メソトレキセートがヒト骨肉腫細胞に対するLymphokine Activated Killer活性におよぼす影響

甲氨蝶呤对人骨肉瘤细胞淋巴因子激活杀伤活性的影响

• 批准号: 07671575
• 负责人: 星 栄一
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671575/
• 关键词: メソトレキセート; LAK活性; HLA class-1

(1)メソトレキセート(MTX)投与によるヒト骨肉腫細胞上のHLA class-I,II発現量の変化.MTX耐性ヒト骨肉腫細胞株であるNOS-1細胞2×10^6個を各種濃度(10^<-12>-10^<-8>M)のMTXを含んだ培養液で24時間培養した.その後FACScanを用いて,腫瘍細胞上のHLA class-I,II抗原の発現量をMTXに暴露していないコントロールと比較した.HLA class-Iは濃度依存性にその発現量が減弱していた.HLA class-IIはもともと発現量が少なく,MTX暴露によっても明らかな変化は認められなかった.(2)MTXによる骨肉腫細胞に対するLAK感受性の変化.上記の条件で培養したNOS-I細胞をtarget cellとして,LAK細胞に対する感受性を比較検討した.健常成人男性より末梢血液を採取し,Ficoll法により単核球を採取した.単核球を20U/mlのrecombinant Interleukin-2を含んだ培養液で3日間培養しLAK細胞を誘導した.LAK活性は各割合でE:T比をふり4時間^<51>Cr遊離法で測定した.その結果LAK活性は,target cell上のHLA class-1の発現量と逆相関するように,高濃度のMTXで培養したNOS-1細胞程高かった.この結果から骨肉腫細胞は、抗癌剤であるMTXに暴露されるとLAK細胞の腫瘍細胞障害活性に対する感受性が亢進することが判明した.さらにこれには腫瘍細胞上のHLA class-1抗原の発現量が関与しているものと推定された.

(1)The expression of HLA class-I,II in osteoma cells was changed by MTX administration.MTX tolerant osteoma cells were cultured in culture medium containing MTX at various concentrations (10^<-12>-10 ^<-8>M) for 24 hours. After FACScan was used, the amount of HLA class-I,II antigen on tumor cells was reduced in a concentration-dependent manner due to MTX exposure.HLA class-II antigen was reduced in a concentration-dependent manner due to MTX exposure. (2)MTX induced LAK sensitivity changes in osteoblasts. NOS-I cells cultured under the above conditions were compared with LAK cells in terms of sensitivity. Healthy adult male peripheral blood taken,Ficoll method taken LAK cells were induced in culture medium containing 20U/ml recombinant Interleukin-2 for 3 days.LAK activity was measured by E:T ratio for 4 days<51>. LAK activity was negatively correlated with HLA class-1 expression in target cells, and NOS-1 cells were cultured at high MTX concentrations. The results showed that the tumor cells were sensitive to MTX and anti-tumor activity. The expression of HLA class-1 antigen on tumor cells is closely related to the putative expression of HLA class-1 antigen.

项目成果

堀田哲夫: "骨肉腫の骨誘導能とBMP遺伝子の発現" 日整会誌. 69(6). 978-978

Tetsuo Hotta：“骨肉瘤的骨诱导能力和 BMP 基因表达”日本健康科学学会杂志 69（6）。

堀田哲夫: "悪性血管外皮腫に対するIL-2による治療経験" 日整会誌. 69(6). 1091-1091

Tetsuo Hotta：“IL-2 治疗恶性血管外皮瘤的经验”，日本文学会杂志 69(6)。

堀田哲夫: "穿刺細胞診における誤診例の検討" 日整会誌. 69(6). 965-965

Tetsuo Hotta：“穿刺细胞学误诊病例的研究”日本自治学会杂志69（6）。

堀田哲夫: "切除縁1cm以下の骨軟部腫瘍の局所根治性" 日整会誌. 69(3). 855-855

Tetsuo Hotta：“手术切缘小于或等于 1 厘米的骨和软组织肿瘤的局部治愈性”，日本骨科学会杂志 69(3)。