遺伝子導入培養皮膚を利用した新しい遺伝子療法の開発
遺伝子導入培養皮膚を利用した新しい遺伝子療法の開発
使用基因转移培养皮肤开发新的基因疗法
批准号：
14657461
负责人：
宮坂 宗男
金额：
$2.11万
依托单位：
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2002 至 2003
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ウイルスによる遺伝子導入をさらに発展させるためにLentivirusを用いた実験を行った。遺伝子の発現性を検討するためヒト分離ケラチノサイトにGreen Fluorescent Protein(GFP)遺伝子を導入しin vitroにての遺伝子発現を観察した。またin vivoにおける遺伝子発現についてはE.coli_-galactosidase(LacZ)遺伝子導入ヒト分離ケラチノサイトをSCIDマウスに移植し、経過毎に移植片をβ-Gal染色し観察した。結果として、ヒト分離ケラチノサイトGFP遺伝子を導入し蛍光顕微鏡にて観察したところ蛍光強度は細胞により強弱を認めた。この蛍光強度のバラツキは感染後23日に至っても持続していた。同細胞をフローサイトメーターにて測定したところ全細胞の80~90%に蛍光発現を認めた。GFP遺伝子導入により細胞の増殖性、角化誘導などの形態的変化は認められず非感染細胞と同様の培養経過を示した。蛍光顕微鏡における観察と同様にフロサイトメーターによる観察においても蛍光強度のバラツキが大きかった。in vivoにおけるLacZ遺伝子発現についてもβ-Gal染色にて染色性は持続しており目的遺伝子はin vivoにおいても発現した。平成15年度の考察としてin vitroに置いて認められた蛍光強度のバラツキはGFPプロモーターとして用いたサイトメガロウイルスプロモーターによる一過性発現と感染当初は考えられたがLentivirus感染後23日に至るまで持続しており一過性発現とは異なる原因があると考えられる。今研究によりLentivirusを用いたin vivoでの遺伝子導入方法を確立した。今後、同方法を用いて培養皮膚に目的遺伝子を導入し機能性を発現させる事を検討したい
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E.Kuwabara, F.Furuyama, Kunihisa Ito, E.Tanaka et al.: "Inhomogenous vasodilatory responses of rat tail arteries to heat stress : Evaluation by synchrotron radiation microangiography"Japanese J.of phisiology. 52(5). 403-408 (2002)
E.Kuwabara、F.Furuyama、Kunihisa Ito、E.Tanaka 等：“大鼠尾动脉对热应激的不均匀血管舒张反应：通过同步辐射微血管造影进行评估”日本生理学杂志。
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DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
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通讯作者：
M.Hojo, S.Inokuchi, R.Tanino, H.Nakazawa: "Induction of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) by Fibrin as a Dermal Substrate for Cultured Skin Substitute"Plastic and Reconstructive Surgery. 111(In press). (2003)
M.Hojo、S.Inokuchi、R.Tanino、H.Nakazawa：“纤维蛋白作为培养皮肤替代品的真皮基质诱导血管内皮生长因子 (VEGF)”整形和重建手术。
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DOI：
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发表时间：
期刊：
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作者：
[]
通讯作者：
T.Shimizu, S.Koide, J.N.Yoshimura, K.Kiminori, K.Ito, H.Nakazawa: "Hyperthyroidism and the management of atrial fibrillation"Thyroid. 12. 489-493 (2002)
T.Shimizu、S.Koide、J.N.Yoshimura、K.Kiminori、K.Ito、H.Nakazawa：“甲状腺功能亢进症和心房颤动的治疗”。
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DOI：
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发表时间：
期刊：
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作者：
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通讯作者：
北條元治, 猪口貞樹, 宮坂宗男, 服部禎子, 谷野隆三郎: "東海大学病院における熱傷統計"熱傷. 28. 19-28 (2002)
Motoharu Hojo、Sadaki Inoguchi、Muneo Miyasaka、Teiko Hattori、Ryuzaburo Tanino：“东海大学医院的烧伤统计”Burns，28. 19-28 (2002)。
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发表时间：
期刊：
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作者：
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通讯作者：
S.Takizawa, Y.Aratani, N.Hirabayashi, H.Nakazawa: "Deficiency of myeloperoxidase increases infarct volume and nitrotyrosine formation in mouse brain."J Cereb Flow Metab. 22. 50-54 (2002)
S.Takizawa、Y.Aratani、N.Hirabayashi、H.Nakazawa：“髓过氧化物酶的缺乏会增加小鼠大脑中的梗塞体积和硝基酪氨酸的形成。”J Cereb Flow Metab。
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作者：
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通讯作者：
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