DMH誘発ラット大腸癌肝転移モデルにおける免疫化学療法の転移抑制効果に関する研究

免疫化疗对DMH诱导的大鼠结直肠癌肝转移模型抑制转移作用的研究

• 批准号: 62480279
• 负责人: 畠山 勝義
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1989
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-62480279/
• 关键词: DMH誘発ラット大腸癌; 皮下継代株; 細胞培養株; ラット大腸癌の肝; 肺転移モデル; 免疫化学療法; ラット大腸癌の肝転移モデル; 免疫化学療法による肝転移抑制

前年度はDMH誘発ラット大腸癌の皮下継代株より細胞培養株RCN-9を樹立し検討したが、本年度は15代皮下継代株を培養材料とし、細胞分散法により初代培養を行い、現在までに75代にわたって継代維持されている細胞培養株ACL-15について検討した。この細胞培養株ACL-15は約24時間の倍加時間をもち、細胞飽和密度は5.6×10^5個/cm^2で、染色体モ-ドは89(84〜91)で、多角形細胞が単層敷石状に増殖し、組織学的には印環細胞を有する低分化腺癌である。これを2×10^6個/mlの細胞浮遊液にして脾臓内に注入すると、21日目には7匹中全例に平均転移結節数が64個(34〜100)の肝転移を認める。これは言わば門脈内注入と同様に人工的肝転移と称されるべきものである。そこで5×10^6個/0.1mlの細胞浮遊液を盲腸漿膜下に移植して、その後の肝転移の有無を検討すると、7匹中2匹に(65日後)認められ、これは自然転移能を示すものと思われる。一方、2×10^6個/mlの細胞浮遊液を尾静脈から注入すると、21日目には5匹すべてに平均転移結節数11.4個(4〜19)の肺転移が認められる(人工肺転移)。1×10^7個/mlのものを右前胸部皮下に移植すると、70日目には7匹すべてに腫瘍が生着し、全例とも肺転移を認める(自然肺転移)。以上の実験より、自然転移能(肝及び肺転移)を有する細胞株が樹立され、さらに追加実験を行っているが本邦ではいまだ報告がないことより、統計学的処理のできるまで実験を継続する予定である。

In the past year, cell culture strain RCN-9 was established for DMH induction of colorectal cancer. In this year, cell culture strain ACL-15 was established for 15 generations. Cell dispersion method was used for primary culture. Now, cell culture strain ACL-15 is maintained for 75 generations. The cell culture line ACL-15 was cultured for about 24 hours, the saturation cell density was 5.6×10^5/cm^2, the chromosome number was 89(84 ~ 91), the polygonal cells were cultured in a single layer of stone, and the histological characteristics were similar to those of poorly differentiated adenocarcinoma cells. 2×10^6 cells/ml of suspension were injected into the spleen on the 21st day, and the average number of metastatic nodules in 7 cases was 64 (34 ~ 100). This is the first time I've ever seen a patient. 5×10^6 cells/0.1ml of cell suspension were transplanted under the cecum serosa, and the presence or absence of liver metastasis after transplantation was discussed. 2 out of 7 cells (after 65 days) were identified and the natural migration ability was demonstrated. A square, 2×10^6 cells/ml suspension was injected into the tail vein, and the average number of metastatic nodules was 11.4 (4 ~ 19) on the 21st day (artificial lung metastasis). 1×10^7 cells/ml were transplanted subcutaneously into the right anterior chest, 7 cells were transplanted subcutaneously into the right anterior chest on the 70th day, and all cells were transplanted subcutaneously into the right anterior chest. The above results, natural migration (liver and lung migration), cell lines were established, and additional data were reported. Statistical analysis was performed.