HIVのエンベロープ構造と機能

HIV包膜结构和功能

• 批准号: 04670282
• 负责人: 後藤 俊幸
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Osaka Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670282/
• 关键词: AIDS; 極低温高分解能電子顕微鏡; 免疫電子顕微鏡法; HIV-1; エンベロープ; ウイルス; モノクローナル抗体; フリーズフラクチア

HIVが細胞へ侵入・感染する機序を知る目的で、HIVのエンベロープ構造と機能について検討した。1. HIVウイルス粒子のエンベロープ構造 濃縮精製したHIV粒子をアルデヒド固定後分散させ、無染色のまま氷包埋法により極低温高分解能電子顕微鏡で直接観察した。HIVのエンベロープ構造は、2重膜とその膜に一部埋まった突起様構造からなり、突起様構造は直径4.8nmの球形の“knob"と長さ3.2nmの柄からなっていることが明瞭に観察された。また、2重膜内の膜内粒子はフリーズフラクチア法により観察され、球状をしていた。2. エンベロープの反応性 ウイルス粒子に抗HIV-1モノクローナル抗体やConAなどのレクチンを反応させ、金標識して電子顕微鏡観察すると、抗gag抗体(抗p18、抗p24抗体)では反応はみられなかったが、抗env抗体(抗gp120/gp160抗体)はエンベロープに反応し、また、レクチンも同様に反応し糖鎖の存在も確認した。しかし、その反応量は極低温電顕で観察された突起様構造の数よりも極端に少なく、通常の免疫反応では突起様構造数個に1個の抗体やレクチンが反応するのであろうと考えた。3.エンベロープと細胞の結合 ウイルス粒子を細胞に感染されると、数分以内に細胞内に侵入する。この侵入の瞬間にはエンベロープと細胞膜との間にそれぞれ単独よりも太い連結物が観察され、おそらく突起構造と、細胞のレセプターとの結合物と考えられた。さらにその結合状態の微細構造を検討中している。

HIV cell invasion and infection mechanisms for the purpose of understanding, HIV cell structure and function of the study 1. HIV particles are purified by structural concentration, dispersed after immobilization, embedded without staining, and detected directly by electron microscopy at extremely low temperatures and high decomposition energies. The structure of HIV is composed of two layers of membrane, one part of which is buried in the membrane, and the other part of which is embedded in the membrane. The structure of HIV is composed of spherical "knob" with diameter of 4.8 nm and handle length of 3.2 nm. The particles in the two-layer film are observed by the method of spherical particles. 2. Anti-HIV-1 anti-HIV-1 anti-HIV-1 In addition, the number of anti-tumor cells detected by the ultra-low temperature electric field is extremely small, and the number of anti-tumor cells detected by the normal immune field is 1. 3. Cell infection and intracellular invasion by particles The invasion of the cell membrane and the space between the two sides of the cell membrane and the space between the two sides of the cell membrane The microstructure of the composite state is discussed in the middle of the discussion.

项目成果

GOTO, Toshiyuki: "Projection structures of HIV-1 observed with high resolution electron cryo-microscopy" Electron Microscopy. 2. 162-163 (1992)

GOTO, Toshiyuki：“用高分辨率电子冷冻显微镜观察到的 HIV-1 的投影结构”电子显微镜。

KISHI, Masahiko: "Surviving infection by human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1):the vif or vpu mutant generates cells producing noninfectious or markedly reduced cytopathic HIV-1 particles" J. Gen. Virology. 73. 77-87 (1992)

岸正彦：“在 1 型人类免疫缺陷病毒 (HIV-1) 感染中幸存：vif 或 vpu 突变体产生的细胞产生非感染性或显着减少的细胞病变 HIV-1 颗粒”J. Gen. Virology。

MORITA, Chizuko (Aloia,R.C. and Curtain,C.C. ed.): "Advance in Membrane Fluidity series vol.6 “Membrane Interaction of HIV--Implications for pathogenesis and therapy in AIDS"" Wiley-Liss, Inc., 433 (1992)

MORITA, Chizuko（Aloia，R.C. 和 Curtain，C.C. 编辑）：“膜流动性进展系列第 6 卷“HIV 的膜相互作用——对 AIDS 发病机制和治疗的影响””Wiley-Liss, Inc.，433（1992 年） ）

中井 益代 (日本電子顕微鏡学会編): "電子顕微鏡学" 学際企画, 585 (1992)

Masuyo Nakai（日本电子显微镜学会编）：《电子显微镜》跨学科项目，585（1992）

FUKUI,Takeshi: "Inner architecture of human and simian immunodeficiency viruses" Microscopy Research and Technique(in press). (1993)

FUKUI，Takeshi：“人类和猿猴免疫缺陷病毒的内部结构”显微镜研究与技术（出版中）。