アレルギー疾患及び自己免疫疾患におけるT細胞アポトーシスの役割に関する基礎的検討

今年度は、すでに樹立していた臍帯血由来のヘルパーT細胞株に加え、成人末梢血よりPPD特異的ヘルパーT細胞株を樹立し解析を行い、以下の点を明らかにした。(1)これらの細胞は、抗CD3抗体をcoatしたplateで培養しT細胞レセプターに刺激を与えると著明なApoptosisを起こした。これは、DNAの断片化や特徴的な細胞形態の変化で確認した。(2)これらのapoptosisはT細胞をmonocyteと共培養する事により、阻止された。(3)このmonocyteによるapoptosisの阻止には、T細胞とmonocyteを同時に培養する必要はなく、precultureし、その後monocyteを除いても観察された。(4)このapoptosisの阻止は、T細胞のCD3を介する刺激を阻止して誘導した物ではなく、サイトカインの産生や、細胞増殖で見る限り、逆にT細胞はよく活性化されていた。(5)monocyteによるT細胞apoptosisの阻止は、液性因子を介する物ではなく、細胞間の接触を必要とした。(6)monocyteの細胞表面を化学的に固定するとapoptosis阻止能は失われた。以上のことより、ヘルパーT細胞の活性化過程には、抗原提示細胞との細胞間接触により、常にapoptosisを阻止するsignalが供給されていることを明らかにし以下のjournalに投稿し、現在in pressとなっている。さらに、この細胞間接触に関与する表面分子の解析を進めて行きたい。

今年度は、すでに樹立していた臍帯血由来のヘルパーT細胞株に加え、成人末梢血よりPPD特異的ヘルパーT細胞株を樹立し解析を行い、以下の点を明らかにした。(1)これらの細胞は、抗CD3抗体をcoatしたplateで培養しT細胞レセプターに刺激を与えると著明なApoptosisを起こした。これは、DNAの断片化や特徴的な細胞形態の変化で確認した。(2)これらのapoptosisはT細胞をmonocyteと共培養する事により、阻止された。(3)このmonocyteによるapoptosisの阻止には、T細胞とmonocyteを同時に培養する必要はなく、precultureし、その後monocyteを除いても観察された。(4)このapoptosisの阻止は、T細胞のCD3を介する刺激を阻止して誘導した物ではなく、サイトカインの産生や、細胞増殖で見る限り、逆にT細胞はよく活性化されていた。(5)monocyteによるT細胞apoptosisの阻止は、液性因子を介する物ではなく、細胞間の接触を必要とした。(6)monocyteの細胞表面を化学的に固定するとapoptosis阻止能は失われた。以上のことより、ヘルパーT細胞の活性化過程には、抗原提示細胞との細胞間接触により、常にapoptosisを阻止するsignalが供給されていることを明らかにし以下のjournalに投稿し、現在in pressとなっている。さらに、この細胞間接触に関与する表面分子の解析を進めて行きたい。