Calreticulin遺伝子変異による骨髄増殖性疾患発症のメカニズムの解明

点击翻译按钮获取中文摘要

1. 変異CALRによるJAK-STAT経路の活性化にTPORが必須である事の証明1A. 機能欠失型TPORを用いた検証：機能欠失型変異TPOR (アミノ酸524-526: PDL-->AAA)を発現するBa/F3細胞を作成後del-CALRを発現させたところ、野生型のTPORを発現したBa/F3細胞はトランスフォームしたが、機能欠失型変異TPOR発現 Ba/F3細胞はトランスフォームしなかった。これによりTPORが変異CALRによるJAK-STAT経路の活性化にTPORが必須である事が再確認された。2. 変異CALRがTPOR-JAK2-STAT5経路を活性化するメカニズムの解明2A. 変異CALR細胞における既知のJAK2-STAT5経路制御分子の発現レベルの検討：Wtあるいはdel-CALRを導入したBa/F3-TPOR細胞を用いて、JAK2-STAT5経路の活性化を制御することが知られている分子(SOCS1,3, SHP2, SHIP, LNK, CBL)の発現、活性化に差異があるかどうかをウェスタンブロッティングで検討した。 いずれも発現に差はなく、JAK2シグナルの活性化はこれらの分子の異常によるものではないことが示唆された。2B. 変異CALR細胞における未知のJAK2-STAT5経路制御分子の発現レベルの検討：Wtあるいはdel-CALRを導入したBa/F3-TPOR細胞を用いてマイクロアレイによる遺伝子発現プロファイリングを行った。現在データ解析中である。