UCHL1-HIF-1経路による放射線治療抵抗性の分子メカニズムの解明と対策

UCHL1-HIF-1通路阐明放疗抵抗的分子机制及对策

• 批准号: 17H06812
• 负责人: 中島 良太
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-08-25 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H06812/
• 关键词: 放射線治療抵抗性; 代謝リプログラミング; グルタチオン; 放射線腫瘍学; 放射線増感; 低酸素

まず始めに、乳がん細胞株EMT6において、脱ユビキチン化酵素ubiquitin C-terminal hydrolase L1 (UCHL1)を過剰発現したときに、転写因子Hypoxia-inducible factor 1 (HIF-1)の活性が上昇することを確認した。その上で、EMT6にUCHL1を過剰発現したところ、細胞内の乳酸が増加する一方、クエン酸回路の中間代謝産物であるクエン酸やイソクエン酸は減少していることを確認した。さらに、HIF-1をノックダウンしたときには、これらの変化は認められず、UCHL1-HIF-1経路がグルコース代謝のリプログラミングを引き起こしていることが分かった。続いて、UCHL1によるNADPH/NADP+比, GSH/GSSG比の変化を測定したところ、共に上昇しており、ペントースリン酸経路の律速酵素G6pdxをsiRNAを用いてノックダウンしたところ、これらの変化が認められなくなった。これより、UCHL1-HIF-1経路は、ペントースリン酸経路依存的に還元型グルタチオンを増加させていることが分かった。そして、コロニー形成試験によって、UCHL1がHIF-1依存的に放射線抵抗性を獲得していること、さらにペントースリン酸経路の律速酵素G6pdxの阻害剤6ANを用いると、UCHL1による放射線抵抗性が減少することを確認した。以上より、UCHL1-HIF-1経路がグルコース代謝のリプログラミングを引き起こし、ペントースリン酸経路依存的な還元型グルタチオンの増加によって放射線抵抗性に寄与しており、治療標的になり得ることを示した。上記、内容をScientific Reports誌に報告した。

Ubiquitin C-terminal hydrolase L1 (UCHL1) Ubiquitin C-terminal hydrolase L1 (UCHL1) Hypoxia-inducible The activity of factor 1 (HIF-1) has increased and the activity has been confirmed.その上で, EMT6 UCHL1 したところ, intracellular lactic acid がincrease するlateral, クThe intermediate metabolite of the ethanoic acid circuit, ethanoic acid, is reduced and confirmed.さらに、HIF-1をノックダウンしたときには、これらの変化はcognitionめられず、UCHL1 -HIF-1経路がグルコース Metabolism のリプログラミングをinduced き出こしていることが分かった.続いて、UCHL1によるNADPH/NADP+ ratio, GSH/GSSG ratio change measurement, total rise rate, and ペントースリン sour 経路 no rhythm quick fermentation The original G6pdx siRNA is made of いてノックダウンしたところ、これらの変化が见められなくなった.これより、UCHL1-HIF-1経路は、ペントースリン sour 経Lu Yi Cun's グルタチオンを Increase plus させていることが分かった.そして, コロニー Formation test 験によって, UCHL1 がHIF-1 dependent radiation resistance を acquisition していること, さらにペントーIt has been confirmed that the inhibitory effect of スリン経路のRichiozyme G6pdx 6AN has been confirmed by using いると and UCHL1 によるRadiation Resistance Reduction することを. The above より, UCHL1-HIF-1経路がグルコース Metabolism のリプログラミングをinducingきこし, ペントースリン acid 経The radiation-resistant radiation-resistant radiation-resisting radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation, and the therapeutic target radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation-resistant radiation. The content of the above note is Scientific Reports.