関節リウマチ膝で滑膜幹細胞収量を関節液中の間葉系幹細胞から予測する

从关节液中的间充质干细胞预测类风湿性关节炎膝盖的滑膜干细胞产量

• 批准号: 18H06250
• 负责人: 河野 佑二
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-08-24 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18H06250/
• 关键词: 関節リウマチ; 滑膜由来幹細胞; 関節液由来幹細胞; 滑膜幹細胞; 関節液

我々は関節リウマチ（RA）膝および変形性関節症（OA）膝の滑膜由来間葉系幹細胞（滑膜幹細胞）の平均収量および軟骨分化能は同等だが、RA滑膜幹細胞は収量のばらつきが大きいことを報告した。RA滑膜幹細胞による軟骨・半月板再生医療を行う際に、あらかじめ収量を予測できれば、培養期間の調整が可能になる。本研究の目的はRA関節液中の間葉系幹細胞を解析し、滑膜幹細胞の収量との関係性を明らかにすることである。本研究で個々の症例における関節液中の間葉系幹細胞の性状と滑膜幹細胞収量との関係性や寄与する因子を明らかにすることは、RA滑膜幹細胞収量のばらつきの原因を同定し、収量の安定化につながるため、極めて創造性が高くかつ臨床上重要な研究である。研究実施計画どおりの方法で、人工膝関節置換術中に得られるRA関節液および滑膜を使用した(n=10)。これまでの知見に基づき、関節液は1.5mlを4倍希釈して1.0mlずつ60cm2 dish-6枚に播種、滑膜は酵素処理後の有核細胞を104個ずつ60cm2 dish-6枚に播種した。それぞれ14日間培養し、3枚をcrystal violet染色でコロニー形成を確認し、残りの3枚の細胞数を評価した後、継代して多分化能と表面抗原を解析した。結果、関節液および滑膜有核細胞を14日間培養し、得られた回収細胞の表面抗原および多分化能を解析すると、両群とも間葉系幹細胞の特徴を有していた。滑膜幹細胞の収量は関節液中のコロニー形成細胞数と相関した（R2=0.64）一方で、関節液量とは相関しなかった。RA膝も滑膜幹細胞による軟骨・半月板再生医療の適応になりうるが、収量のばらつきが問題であった。本研究で、関節液中のコロニー形成細胞数が、滑膜幹細胞収量の指標になると考えられた。培養期間や継代数を事前に調整することにより、RA滑膜から十分な細胞数の確保が可能になる。

The average amount of synovial derived mesenchymal stem cells (synovial stem cells) and cartilage differentiation ability of knee joint in RA and OA are reported. RA Synovial Stem Cells: Cartilage and Meniscus Regeneration Therapy: Predicting the Amount of Synovial Stem Cells and Adjusting the Culture Period The aim of this study was to elucidate the relationship between mesenchymal stem cells and synovial stem cell abundance in RA synovial fluid. This study is aimed at identifying the relationship between the characteristics of mesenchymal stem cells and synovial stem cell production in synovial fluid and the causes of synovial stem cell production in RA, as well as the stability of production and creativity of mesenchymal stem cells. The study was conducted to investigate the use of synovial fluid and synovial membrane in knee arthroplasty (n=10). This is the first time that we have seen the basic cells, synovial fluid, 1.5ml, 4 times, 1.0ml, 60 cm2 dish-6 seeds, synovial enzyme treated nucleated cells, 104 seeds, 60 cm2 dish-6 seeds. The number of cells remaining in the culture was evaluated after 14 days of culture, and the number of cells remaining in the culture was determined by crystal violet staining. Results: Synovial nucleated cells were cultured in 14 days, and the surface antigen and differentiation ability of cultured mesenchymal stem cells were analyzed. The number of synovial stem cells in synovial fluid was correlated with the number of cells forming synovial fluid (R2=0.64). RA knee synovial stem cells are suitable for cartilage and meniscus regeneration. In this study, the number of synovial stem cells in synovial fluid and the number of synovial stem cells were examined. During the culture period, the number of cells can be adjusted in advance, and the number of RA synovium cells can be ensured.

项目成果

関節リウマチ膝で関節液中の間葉系幹細胞数は滑膜幹細胞収量の指標になる

类风湿膝关节患者滑液中间充质干细胞的数量是滑膜干细胞产量的指标。

• 发表时间: 2018
• 作者: 河野 佑二;水野 満;小田邉 浩二;大関 信武;片野 尚子;古賀 英之;辻 邦和;金子 晴香;高澤 祐治;大川 淳;関矢 一郎
• 通讯作者: 関矢 一郎

Yields of MSCs from Synovial Fluid Reflect Yields of MSCs from the Synovium of RA Knees

滑液中 MSC 的产量反映了 RA 膝关节滑膜中 MSC 的产量

• 发表时间: 2019
• 作者: Yuji Kohno;Mitsuru Mizuno;Koji Otabe;Nobutake Ozeki;Hisako Katano;Keiichiro Komori;Kunikazu Tsuji;Mikio Matsumoto;Haruka Kaneko,Yuji Takazawa;Hideyuki Koga;Ichiro Sekiya
• 通讯作者: Ichiro Sekiya