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超高線量率照射法FLASHによる腫瘍選択的DNA酸化損傷の質量顕微鏡的検証

使用超高剂量率照射方法FLASH对肿瘤选择性DNA氧化损伤进行质量显微镜验证

基本信息

批准号：
21K20798
负责人：
荒牧修平
金额：
$ 2万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-08-30 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K20798/
关键词：
質量顕微鏡質量分析イメージング DNA 超高線量率照射法

项目摘要

本研究の目的であった、「FLASHによる腫瘍部と正常組織におけるＤＮＡ酸化損傷を、質量顕微鏡を用いて分子レベルで検証すること」に対し、本年度は、質量顕微鏡によるDNA観察プロトコルの開発を行った。プロトコルの基本的な流れとしては、試料の脂質を洗浄、除去し、その後タンパク質を分解、そして最後にヌクレアーゼによって、DNA二重らせん構造を消化するといった手順で行った。具体的には、酵素の量や時間、そして、質量顕微鏡で用いるマトリックスというイオン化促進剤の種類や濃度について条件調整を行った。質量顕微鏡はレーザーを使ってイオン化を行うMALDIを搭載する装置を用いた。その結果、デオキシヌクレオシドの質量顕微鏡での観察に成功した。またRNA由来のヌクレオシドも高い感度で観察することができた。ところが、本来目的としていた、8oxoguanosineとRNA由来のguanosineの分子量が同じであったため、さらにグリコシラーゼで塩基レベルを観察する方針とした。その結果、8oxo-guanosineの標品から8oxo-guanineを観察することには成功したが、生体組織から塩基レベルのシグナルは検出することができなかった。今後は、生体試料からの塩基シグナルを検出できるよう、条件を検討したい。また、本来質量顕微鏡が得意とする脂質領域についても測定を行っていきたい。本成果を第27回浜松医科大学シンポジウムで発表し、優秀賞を受賞した。

本研究目的的实验结果，“FLASH闪存芯片部分正常工作时的DNA酸化反应，微量微球使用标准分子探针进行DNA测序"，本年度报告，微量微球使用DNA示波器进行DNA测序。DNA测序是一种基本的流动测序技术，包括DNA测序、DNA测序等。具体的には、酵素の量や時間、そして、質量顕微鏡で用いるマトリックスというイオン化促進剤の種類や濃度について条件調整を行った。定量微生物降解酶抑制剂使骨钙素化护理行MALDI诱导凋亡装置使用。その結果、デオキシヌクレオシドの質量顕微鏡での観察に成功した。RNA由于高敏感度的示波器检测到RNA而引起的异常。鸟苷酸，本发明目的的鸟苷酸，8-氧代鸟苷酸RNA由于鸟苷酸分子量相同而引起突变，因此，鸟苷酸的合成是一种新型的非核苷酸类化合物。鸟嘌呤，8氧代鸟嘌呤核苷类药物，8氧代鸟嘌呤示波器，示波器。今後は、生体試料からの塩基シグナルを検出できるよう、条件を検討したい。また、本来質量顕微鏡が得意とする脂質領域についても測定を行っていきたい。本成果を第27回浜松医科大学シンポジウムで発表し、優秀賞を受賞した。