遺伝子組換と非ウイルスベクター技術を用いた培養に頼らないウイルスの浄水処理性評価

利用基因重组和非病毒载体技术评估不依赖培养的病毒水净化性能

• 批准号: 22H00221
• 负责人: 松下 拓
• 金额: $ 26.96万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H00221/
• 关键词: 土木環境システム; ウイルス; 浄水処理

本研究では、PCR法にて高感度で定量可能な「外来DNAを封入したノロウイルスの外套タンパク粒子（VLPs）」を、あらかじめ作製したVLPsを還元剤の添加によりいったん崩壊させた後、外来DNA共存下での塩化カルシウムの添加によりVLPsを再合成させることにより外来DNAをVLPsに封入し、作製しようと試みてきた。しかしながら、昨年度での検討では外来DNAの封入率が著しく低く、このようなDNA封入VLPsを用いても、計画当初の目標であった「低濃度ノロウイルスの浄水処理性の評価」が困難であると判断された。そこで本年度は、既にVLPsへ封入が高い率にて成功している金ナノ粒子に、あらかじめ外来DNAを修飾し、金ナノ粒子とともにVLPsへ封入する手法を試みた。しかしながら、電子顕微鏡の観察では、明確な封入が確認されなかった。これに対し、カルボキシ-EG6-ウンデカンチオールを用いたコーティング処理を金ナノ粒子に施すと、DNA修飾をしていない金ナノ粒子の封入率が大幅に向上することが分かった。今後、コーティング処理を施したDNA金ナノ粒子複合体を用いて、VLPsへの外来DN A封入を試みる予定である。一方、浄水処理方式を、通常の浄水処理で行われる凝集－沈澱－砂ろ過処理から、凝集－MF膜処理へと変更した、札幌近郊の2つの浄水場にて、トウガラシ微斑ウイルス（PMMoV）の浄水処理工程における除去率をそれぞれ複数回調査し、変更前の除去率と比較したところ、A浄水場では、通常処理で1.5～3.3 log、膜処理では2.2.～2.9 logであり、B浄水場では、通常処理で3.2～4.7 log、膜処理では2.8～4.4 logであった。すなわち、凝集－MF膜処理でのPMMoVの除去率は、凝集－沈澱－砂ろ過処理での除去率と概ね同程度であることが分かった。

This study で は, PCR method に て で quantitative Gao Gan degrees may な を "foreign DNA し sealed た ノ ロ ウ イ ル ス の coat タ ン パ ク particle (VLPs)" を, あ ら か じ め cropping し た VLPs を yuan tonic の added に よ り い っ た ん collapse 壊 さ せ た coexist, the foreign DNA after で の salt chemical カ ル シ ウ ム の add に よ り VLPs を again The foreign DNAをVLPsに is encapsulated in <s:1> and prepared by みて た た た た た. し か し な が ら, yesterday's annual で の beg で 検 は foreign DNA の rate が the sealed し く low く, こ の よ う な DNA VLPs sealed を with い て も, plan at the beginning の target で あ っ た "low concentration ノ ロ ウ イ ル ス の incorporated water 処 rational の review 価" が difficult で あ る と judgment さ れ た. そ こ で は this year, both に VLPs へ が sealed high い rate に て successful し て い る gold ナ ノ particle に, あ ら か じ め foreign DNA を modified し, gold ナ ノ particle と と も に VLPs へ す sealed る gimmick を try み た. <s:1> ながら, electronic 顕 micromirror 観 観 examination で った, clear な encapsulation が confirmation されな った った った. こ れ に し, seaborne カ ル ボ キ シ EG6 - ウ ン デ カ ン チ オ ー ル を with い た コ ー テ ィ ン グ 処 Richard を gold ナ ノ particle に shi す と, DNA modified を し て い な い gold ナ ノ particle rate sealed の が に sharply upward す る こ と が points か っ た. In the future, コ ー テ ィ ン グ 処 Richard を shi し た DNA gold ナ ノ composite particles を with い て, VLPs へ の foreign DN を sealed A try み る designated で あ る. One way, incorporated water 処 を, usually の incorporated water line 処 reason で わ れ る agglutination ever - precipitates - sand ろ 処 Richard か ら, agglutination - MF membrane 処 へ と - more し た, Sapporo suburban の 2 つ の water yards at に て, ト ウ ガ ラ シ micro spot ウ イ ル ス (PMMoV) の incorporated water 処 manage engineering に お け る removal rate を そ れ ぞ れ plural back to investigate し, と before - more の remove rate comparison し た と こ ろ, A water yards at で は, usually 処 で 1.5 ~ 3.3 log, membrane 処 で は 2.2 ~ 2.9 log で あ り, B water yards at で は, usually 処 で 3.2 ~ 4.7 log, membrane 処 で は 2.8 ~ 4.4 log で あ っ た. す な わ ち, agglutination - MF membrane 処 で の PMMoV の は removal rate, agglutination - precipitates - sand ろ 処 Richard で の removal rate are ね と with degree で あ る こ と が points か っ た.

项目成果

汎用細胞増殖系を活用した浄水処理工程におけるヒトサポウイルスの未知動態の解明

使用通用细胞增殖系统阐明水净化过程中人沙波病毒的未知动态

• 发表时间: 2022
• 作者: 白崎伸隆;胡秋晗;白川大樹;高木弘隆;岡智一郎;松下拓;松井佳彦
• 通讯作者: 松井佳彦

汎用細胞増殖系を活用した下痢症ウイルスの浄水処理性の評価

使用通用细胞增殖系统评价腹泻病毒的水净化特性

• 发表时间: 2022
• 作者: 白崎伸隆;胡秋晗;白川大樹;高木弘隆;岡智一郎;松下拓;松井佳彦
• 通讯作者: 松井佳彦

ウイルス粒子の状態変化はウイルスの凝集沈澱－砂ろ過処理性にどの程度影響するのか？

病毒颗粒状态的变化在多大程度上影响病毒的混凝沉降——砂过滤加工性？

• 发表时间: 2023
• 作者: 平岩竜士;白崎伸隆;松下拓;松井佳彦
• 通讯作者: 松井佳彦

Evaluation of reduction efficiencies of pepper mild mottle virus and human enteric viruses in full-scale drinking water treatment plants employing coagulation-sedimentation-rapid sand filtration or coagulation-microfiltration

采用混凝-沉淀-快速砂滤或混凝-微滤的大型饮用水处理厂对辣椒轻度斑驳病毒和人类肠道病毒的去除效果评价

• DOI: 10.1016/j.watres.2022.118160
• 发表时间: 2022
• 期刊: Water Research
• 影响因子: 12.8
• 作者: Shirakawa;D.;Shirasaki;N.;Matsushita;T.;Matsui;Y.;Yamashita;R.;Matsumura;T. and Koriki;S.
• 通讯作者: S.