遺伝子組換と非ウイルスベクター技術を用いた培養に頼らないウイルスの浄水処理性評価

利用基因重组和非病毒载体技术评估不依赖培养的病毒水净化性能

• 批准号: 22H00221
• 负责人: 松下 拓
• 金额: $ 26.96万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H00221/
• 关键词: 土木環境システム; ウイルス; 浄水処理

本研究では、PCR法にて高感度で定量可能な「外来DNAを封入したノロウイルスの外套タンパク粒子（VLPs）」を、あらかじめ作製したVLPsを還元剤の添加によりいったん崩壊させた後、外来DNA共存下での塩化カルシウムの添加によりVLPsを再合成させることにより外来DNAをVLPsに封入し、作製しようと試みてきた。しかしながら、昨年度での検討では外来DNAの封入率が著しく低く、このようなDNA封入VLPsを用いても、計画当初の目標であった「低濃度ノロウイルスの浄水処理性の評価」が困難であると判断された。そこで本年度は、既にVLPsへ封入が高い率にて成功している金ナノ粒子に、あらかじめ外来DNAを修飾し、金ナノ粒子とともにVLPsへ封入する手法を試みた。しかしながら、電子顕微鏡の観察では、明確な封入が確認されなかった。これに対し、カルボキシ-EG6-ウンデカンチオールを用いたコーティング処理を金ナノ粒子に施すと、DNA修飾をしていない金ナノ粒子の封入率が大幅に向上することが分かった。今後、コーティング処理を施したDNA金ナノ粒子複合体を用いて、VLPsへの外来DN A封入を試みる予定である。一方、浄水処理方式を、通常の浄水処理で行われる凝集－沈澱－砂ろ過処理から、凝集－MF膜処理へと変更した、札幌近郊の2つの浄水場にて、トウガラシ微斑ウイルス（PMMoV）の浄水処理工程における除去率をそれぞれ複数回調査し、変更前の除去率と比較したところ、A浄水場では、通常処理で1.5～3.3 log、膜処理では2.2.～2.9 logであり、B浄水場では、通常処理で3.2～4.7 log、膜処理では2.8～4.4 logであった。すなわち、凝集－MF膜処理でのPMMoVの除去率は、凝集－沈澱－砂ろ過処理での除去率と概ね同程度であることが分かった。

This study is based on the fact that the PCR method has high sensitivity and is capable of quantification, and can be used to seal in foreign DNA. Jacket VLPs (VLPs)"を、あらかじめproducedしたVLPsをreturning to the original cutのaddedによAfter the collapse of the りいったんさせた, under the coexistence of foreign DNA, the カルシウムのadded によりVLPs We resynthesize foreign DNA and seal it into VLPs, and we make and test it.しかしながら、Last year's での検検ではThe foreign DNA encapsulation rate was low and the このようなDNA was enclosed in VLPs. The original goal of the project was "Evaluation of Low Concentration Water Purification Treatment Properties", but it was difficult to judge. This year, the VLPs have been sealed with high success rates and the gold particles have been successfully sealed. The foreign DNA has been modified, and the gold particles have been sealed into VLPs using a test method.しかしながら、electronic micro-mirror の禳看では、clear なsealing がconfirmation されなかった.これに対し、カルボキシ-EG6-ウンデカンチオールを Use いたコーティング to process を金ナノ grains The rate of encapsulation of the particles is greatly increased, and the DNA modification rate is greatly improved. From now on, it is planned to test the use of DNA gold nanoparticle complexes and VLPs by encapsulating foreign DNA in the コーティング treatment. On the one hand, the water purification treatment method is, the usual water purification treatment is agglomeration-sedimentation-sand processing, agglomeration-MF membrane treatment is more, the water purification field in the suburbs of Sapporo is 2つの, and the water purification field is micro Multiple surveys on the removal rate of PMMoV (PMMoV) water purification treatment projectし、Comparison of removal rate before update、A water purification plant では、Normal treatment 1.5～3.3 log, membrane treatment: 2.2.～2.9 log, B water purification plant: normal treatment: 3.2～4.7 log, membrane treatment is 2.8～4.4 log is used.すなわち, agglomeration-MF membrane treatment and removal rate of PMMoV, agglomeration-precipitation-sand processing and removal rate of the same degree are the same.

项目成果

汎用細胞増殖系を活用した浄水処理工程におけるヒトサポウイルスの未知動態の解明

使用通用细胞增殖系统阐明水净化过程中人沙波病毒的未知动态

• 发表时间: 2022
• 作者: 白崎伸隆;胡秋晗;白川大樹;高木弘隆;岡智一郎;松下拓;松井佳彦
• 通讯作者: 松井佳彦

汎用細胞増殖系を活用した下痢症ウイルスの浄水処理性の評価

使用通用细胞增殖系统评价腹泻病毒的水净化特性

• 发表时间: 2022
• 作者: 白崎伸隆;胡秋晗;白川大樹;高木弘隆;岡智一郎;松下拓;松井佳彦
• 通讯作者: 松井佳彦

ウイルス粒子の状態変化はウイルスの凝集沈澱－砂ろ過処理性にどの程度影響するのか？

病毒颗粒状态的变化在多大程度上影响病毒的混凝沉降——砂过滤加工性？

• 发表时间: 2023
• 作者: 平岩竜士;白崎伸隆;松下拓;松井佳彦
• 通讯作者: 松井佳彦

Evaluation of reduction efficiencies of pepper mild mottle virus and human enteric viruses in full-scale drinking water treatment plants employing coagulation-sedimentation-rapid sand filtration or coagulation-microfiltration

采用混凝-沉淀-快速砂滤或混凝-微滤的大型饮用水处理厂对辣椒轻度斑驳病毒和人类肠道病毒的去除效果评价

• DOI: 10.1016/j.watres.2022.118160
• 发表时间: 2022
• 期刊: Water Research
• 影响因子: 12.8
• 作者: Shirakawa;D.;Shirasaki;N.;Matsushita;T.;Matsui;Y.;Yamashita;R.;Matsumura;T. and Koriki;S.
• 通讯作者: S.