ブランチポイントを標的とした新たなエクソンスキップ法の確立

针对分支点的新外显子跳跃方法的建立

• 批准号: 22K20710
• 负责人: 大原 寛明
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20710/
• 关键词: スプライシング; ブランチポイント; アンチセンス核酸

本研究の目的は、アンチセンス核酸（AON）によるエクソンスキップ法の標的配列として、スプライシング制御機構の重要なエレメントであるブランチポイント（BP）を活用する方法論を確立することである。AONによるエクソンスキップ法の標的はエクソン内スプライシング促進配列やスプライス部位が主流であり、スプライシング制御機構の重要なエレメントであるBPは標的とされていない。申請者らは福山型先天性筋ジストロフィーの異常スプライシングを来す変異で、BPもAONの標的配列の有用な候補であることを見出した。本研究ではその知見を発展させ、どのような配列的特徴を持つBPが標的として有効か他の遺伝性疾患においても解析している。本年度はin silicoツールを用いてBPを予測し、BPの強さもスコア化した。これらの予測されたBPを標的としたAONを作成し、細胞実験・RT-PCRを行い、AONのエクソンスキップ評価を行っている。またエクソン-イントロン境界の評価として、3’スプライス部位と5’スプライス部位のスプライシング制御因子との結合の強さをin silicoツールでスコア化している。現在、有効なエクソンの分類・抽出を行っており、今後有効なAONではどのような規則性があるのかを明らかにする。本研究の成果は、エクソンスキップ法の標的候補配列を増やし、様々な遺伝子疾患に対し、副作用のより少ない治療に繋がる可能性に期待できる。

The purpose of this study is to establish a methodology for the use of nucleic acid (AON) as an important component of the target alignment and control mechanism of the AON method. AON is an important part of AON control mechanism. It is the main part of AON control mechanism. The applicant has a Fukuyama congenital tendon defect and a potential candidate for BP AON. This study is aimed at understanding the development, characteristics and characteristics of genetic disorders. This year's BP forecast is in silico. AON is the target of the prediction, RT-PCR is performed, and AON is evaluated. 3 '-position, 5'-position, 5 '-position, 5' position, 5 '-position, 5 Now, there is a good classification and extraction, and in the future, there will be a good classification and extraction. The results of this study are expected to increase the number of candidate candidates for treatment of genetic disorders and side effects.

项目成果

ブランチポイントを標的とする偽エクソン型異常スプライシングを是正するためのアンチセンス核酸

反义核酸纠正分支点靶向假外显子型异常剪接

• 发表时间: 2022