膠芽腫に対する(Pro)renin receptorを標的とした分子治療の基礎的研究

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本研究の目的はPRR抗体がWnt signaling及びグリオーマ幹細胞を抑制することで、膠芽腫に対し高い抗腫瘍効果を発揮していることを示し、新規治療薬を確立することである。PRR抗体の抗腫瘍効果をin vitroで評価している。グリオーマ細胞株（U87MG、U251MG、T98G）だけでなく、浮遊培養法で樹立した膠芽腫患者のグリオーマ幹細胞株（MGG23、MGG8）においても検討を行っている。具体的にはWST-1 assayやMTT assay、アポトーシスはフローサイトメトリー、Caspase 3 assay、浸潤能はスクラッチアッセイを用いて検討を行う。グリオーマ細胞株、グリオーマ幹細胞株両方において、抗腫瘍効果を示す結果が出ている。抗体は複数のロットで検討し、最適化を目指している。また、膠芽腫の標準的治療薬であるテモゾロミドとの併用により、相加的な効果を認めた。ウェスタンブロッティングやPCRにて、Wnt signalingの分子や幹細胞マーカーが抑制されていることを証明する。PRR抗体の抗腫瘍効果をin vivoにおいても評価する。グリオーマ細胞株を免疫不全マウスの皮下に移植し、PRR抗体を静脈内投与し、抗腫瘍効果を検証している。抗腫瘍効果の評価方法としては、生存期間の比較や、腫瘍組織切片を用いた体積比較を予定している。グリオーマ幹細胞株による評価や脳内に定位装置を用いてグリオーマ細胞株を移植した脳腫瘍モデルを作成も検討している。PRRと幹細胞の関連を、過去に当院で摘出を行ったグリオーマ例の病理検体を用いて評価している。PRRと幹細胞マーカーの免疫染色を行う。染色率を算出し、PRRと幹細胞マーカーの染色率が相関していることを示す。