光-電子相関顕微鏡観察のための3次元ターゲティング法の開発

光电相关显微镜3D靶向方法的开发

• 批准号: 22K20741
• 负责人: 吉村 安寿弥
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20741/
• 关键词: 光-電子相関顕微鏡法; 電子顕微鏡

光・電子相関顕微鏡法では、蛍光顕微鏡観察で得られる分子情報を、電子顕微鏡観察で得られる形態情報に相関させることで目的構造の正確な定性・定量評価が可能となる。蛍光顕微鏡で観察した視野の形態情報を得るためには、光・電子観察で識別できるランドマークを設け、3次元的な試料中で目的領域を探し出す必要がある。本研究は、様々な試料の樹脂包埋試料の連続超薄切片法に適用でき、誰にでも実行可能で効率的な3 次元ターゲティング手法の開発を目的とする。現在までに第一段階として蛍光標識を含むテスト試料を作製し、以下の2点を実施した。1）赤色の蛍光標識をテストとして選択し、最適な標識のサイズを検討した。これまでに、目標とする樹脂切片厚の少なくとも4倍以上の標識構造をランドマークとして使用することが画像処理に有効であることが分かった。2）樹脂包埋・薄切前後の試料の光学顕微鏡画像の3次元相関を行うための方法を検討した。主に連続超薄切片の光学顕微鏡画像から切片全体を含む3次元スタックを作成するためのワークフローについて、画像処理による切片画像のスタック作成、アライメントを行った。現段階のアライメント精度はオルガネラレベルの3次元相関のためには不十分であるが、領域の特定には十分であった。計画段階ではターゲティング用の蛍光標識から座標情報を得ることを目指していたが、異なる調整段階の試料で座標情報を正確に決定することは容易ではなかった。そこで目的領域を含む超薄切片を迅速に特定することを第一目標として開発を進める。

The results of optical microanalysis and optical microanalysis were used to detect the molecular information and the results were obtained by optical microanalysis and optical microscope. the results showed that it was possible to determine the accuracy of qualitative and quantitative analysis by means of optical microscopy and optical microanalysis. The optical microphone system detects the situation of the field, the optical system, the optical electronic system, and the target field of the three-dimensional system. In this study, the ultra-thin section method of resin-coated resin-coated materials was used to determine the possible accuracy of the three-dimensional method. Now, in the first paragraph of this section, you will need to know that the light mark contains the material to be used, and the following 2 points will be applied. 1) the red light indicator should be selected, and the most sensitive flag should be selected. The thickness of the fat slice is less than 4 times the thickness of the fat slices. 2) before and after the fat embedding and thin cutting, the optical micro-portrait, the third dimensional phase, the line and the method are used. The main link ultra-thin slice Optical Micro Portrait, the whole slice contains three dimensions, the whole slice is made, the portrait is made, and the image is made. In terms of accuracy, accuracy In the design section, you can use the light to identify the information, so that the information is correct and correct. It is easy to make a decision. The purpose of this paper is to make an ultra-thin section in the field of ultra-thin slicing. The first purpose of this paper is to introduce an advanced technology.