成熟膵島細胞の永続的な増幅誘導方法の探索

糖尿病はβ細胞の分泌するインスリンの絶対的あるいは相対的な作用不足によって発症する。β細胞はほとんど自己複製しないことから、β細胞の再生医療が世界中で試みられてきた。当該研究者は本研究に先立ってMYCLリプログラミングによる成熟膵島細胞増殖誘に成功したている。そこで本研究では、膵島細胞におけるMYCLリプログラミングの機序を紐解くことで、より効率的かつ安全性の高い膵島細胞の増殖誘導方法を開発することを目的とした。1. 膵島細胞における内在性Mycl遺伝子を活性化する因子や経路を明らかにするため、Mycl遺伝子座にルシフェラーゼを組み込んだマウスモデルを作製した。Mycl遺伝子座のプロモーター直下にルシフェラーゼ遺伝子を導入し、また内部標準を検出するため、Rosa26遺伝子座にレニーラルシフェラーゼを導入したES細胞を作製した。Mycl遺伝子は分化とともに発現が低下することから、試験管内でこのES細胞を分化誘導させたところ、ルシフェラーゼ活性も相関して抑制されることを確認した。このES細胞からキメラマウスを作製し、Mycl遺伝子座及びRosa26遺伝子座のそれぞれにおいて生殖系列への移行に成功した。2. 膵島細胞は出生直後に活発な増殖活性を持つ一方で、その後発生とともに増殖活性を失うことが知られている。当該研究者は出生前後での代謝状態の変化に着目した。Myclが強制発現した膵島細胞において特定の代謝経路を活性化させたところ、検討したところ、Myclと協調して増殖を活性化させることが明らかとなった。実際にRNA-seqを行うことで、代謝経路の活性化により増殖関連遺伝子の活性化も認められた。

糖尿病はβ細胞の分泌するインスリンの絶対的あるいは相対的な作用不足によって発症する。β細胞はほとんど自己複製しないことから、β細胞の再生医療が世界中で試みられてきた。当該研究者は本研究に先立ってMYCLリプログラミングによる成熟膵島細胞増殖誘に成功したている。そこで本研究では、膵島細胞におけるMYCLリプログラミングの機序を紐解くことで、より効率的かつ安全性の高い膵島細胞の増殖誘導方法を開発することを目的とした。1. 膵島細胞における内在性Mycl遺伝子を活性化する因子や経路を明らかにするため、Mycl遺伝子座にルシフェラーゼを組み込んだマウスモデルを作製した。Mycl遺伝子座のプロモーター直下にルシフェラーゼ遺伝子を導入し、また内部標準を検出するため、Rosa26遺伝子座にレニーラルシフェラーゼを導入したES細胞を作製した。Mycl遺伝子は分化とともに発現が低下することから、試験管内でこのES細胞を分化誘導させたところ、ルシフェラーゼ活性も相関して抑制されることを確認した。このES細胞からキメラマウスを作製し、Mycl遺伝子座及びRosa26遺伝子座のそれぞれにおいて生殖系列への移行に成功した。2. 膵島細胞は出生直後に活発な増殖活性を持つ一方で、その後発生とともに増殖活性を失うことが知られている。当該研究者は出生前後での代謝状態の変化に着目した。Myclが強制発現した膵島細胞において特定の代謝経路を活性化させたところ、検討したところ、Myclと協調して増殖を活性化させることが明らかとなった。実際にRNA-seqを行うことで、代謝経路の活性化により増殖関連遺伝子の活性化も認められた。