栄養による軟骨成長板幹細胞制御の解明

软骨生长板干细胞营养调节的阐明

• 批准号: 22K20967
• 负责人: 尾市 健
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20967/
• 关键词: 軟骨成長板; シングルセル解析; 幹細胞; 栄養; 細胞系譜実験

我々は先行研究でAxin2CreERT2;R26RZsGreenマウスにタモキシフェンを投与することで、軟骨成長板幹細胞が標識されること、これらの幹細胞が食事制限により分化をやめ自己複製を増強することを見いだした。食事制限により幹細胞が自己複製を増強するメカニズムの詳細を解明し、治療応用へと展開するための研究基盤を作ることを目的としている。本研究では先述のマウスを用いて幹細胞を標識し通常の食事を与えた群および食事制限をもうけた群の軟骨成長板から軟骨細胞を単離し、シングルセルRNA解析を行う。軟骨成長板から蛋白分解酵素を用いて細胞を単離する方法を確立した。この方法で十分な数および高い生存率を有する軟骨細胞が単離できることがFACS解析により明らかになったため、通常の食事を与えた群、食事制限をもうけた群それぞれのサンプルをn=1ずつシングルセル解析に外注し、現在結果を待っている状態である。シングルセル解析に並行してレーザーマイクロダイセクションを用いてRNA-seqを行い、IGF1シグナルを介して栄養状態が幹細胞の挙動を制御していることを同定した。

Axin 2 Creert 2;R26RZsGreen is the first to study the identification and differentiation of cartilage growth plate stem cells. Stem cell replication is enhanced by food restriction, and the detailed explanation and treatment of stem cell replication are discussed in detail. The present study aims to identify and analyze the DNA of stem cells and cartilage growth plates in vitro using stem cells as described above. Cartilaginous growth enzymes are used to isolate cells. The method has a high survival rate and a high number of chondrocytes. The chondrocytes are isolated from each other. The FACS analysis is performed on the basis of the results of FACS analysis. The results of FACS analysis are as follows: The stem cell analysis and control of stem cell activity were determined by RNA-seq and IGF-1.

项目成果

Nutrient-regulated dynamics of chondroprogenitors in the postnatal murine growth plate.

• DOI: 10.1038/s41413-023-00258-9
• 发表时间: 2023-04-21
• 期刊: BONE RESEARCH
• 影响因子: 12.7
• 作者: Oichi, Takeshi;Kodama, Joe;Wilson, Kimberly;Tian, Hongying;Kawasawa, Yuka Imamura;Usami, Yu;Oshima, Yasushi;Saito, Taku;Tanaka, Sakae;Iwamoto, Masahiro;Otsuru, Satoru;Enomoto-Iwamoto, Motomi
• 通讯作者: Enomoto-Iwamoto, Motomi