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歯周組織における創傷治癒時のリンパ管の役割

淋巴管在牙周组织伤口愈合过程中的作用

基本信息

批准号：
22K20990
负责人：
松本修治
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20990/
关键词：
リンパ管歯周組織修復 VEGF-C 歯周組織組織修復

项目摘要

本研究では、これまでにリンパ管蛍光レポーターマウスと組織透明化技術を応用することにより明らかとしてきた歯周組織リンパ管の解析を進め、歯周組織修復過程におけるリンパ管機能を解明することを目的としています。このために（1）リンパ管新生を促進するマウスモデルや遺伝子改変によりリンパ管特異的な細胞死を引きおこすマウスを用いたin vivo解析、（2）独自に単離培養に成功している歯肉由来リンパ管内皮細胞（歯肉LEC）を用いたin vitro解析の2つの解析を進めます。本年度は主に以下の検討を行いました。（1）歯周組織リンパ管のin vivo解析：歯周組織にマイクロインジェクションにより薬剤を局所投与する方法を確立しました。リンパ管特異的蛍光レポーターマウス上顎両側の第二臼歯に7日間絹糸結紮を行った後、除去後の歯周組織にVEGF-Cの局所投与を行うことで、歯周組織修復時のリンパ管の動態を観察可能でした。さらにタモキシフェン投与によりCre発現細胞特異的にジフテリア菌毒素Aサブユニット（DTA）を発現させることができるProx1-CreER; R26-DTAマウスの作製を完了しました。（2）歯肉LECのin vitro解析：まず歯肉LECがリンパ管内皮細胞マーカーであるLyve-1を発現するのみならず、三次元培養することで管状構造を示すことを確認しました。さらにVEGF-C刺激により培養歯肉LECがどのような挙動を示すかについてRNA-seqを用いて解析した結果、VEGF-Cがアポトーシス抵抗性に関与していることが示唆されました。

This study aims to clarify the function of tissue transparency by analyzing tissue transparency. These include: (1) tube-specific cell death promotion,(2) tube-specific endothelial cell (LEC) in vitro analysis, and (3) tube-specific cell regeneration promotion. This year, the following major issues were discussed: (1) Periodical tissue in vivo analysis: Periodical tissue in vivo analysis: Periodical tissue in vivo The changes of VEGF-C in the peridental tissue may be observed during the repair of the second jaw. The production of Prox1-CreER; R26-DTA is complete. (2) Analysis of LEC in vitro: Lyve-1 was found in LEC, and tubular structure was confirmed in three-dimensional culture. VEGF-C stimulation was used to analyze VEGF-C resistance in cultured LEC cells.