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毛包内神経堤由来幹細胞による広範囲顎骨再建法の創成

使用滤泡内神经嵴干细胞创建大范围颌骨重建方法

基本信息

批准号：
22K21024
负责人：
浦野絵里
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21024/
关键词：
神経堤由来細胞骨芽細胞石灰化物骨修復骨再生幹細胞毛包

项目摘要

神経堤由来細胞が緑色蛍光タンパク質（GFP）で標識される遺伝子改変マウス（P0- Cre/GFP ダブルトランスジェニックマウス）を用いて毛包内の神経堤由来細胞を解析した。毛包内の神経堤由来細胞を幹細胞用培地を用いた高純度培養方法にて増殖させた。EGFを含有する幹細胞用培地を用いてコラーゲンゲル上で培養したところ、培養14日目にはGFP陽性細胞が95%以上を占め、高純度にGFP陽性細胞（神経堤由来細胞）を培養することに成功した。増殖したGFP陽性細胞をBMP-2含有培地にて培養し、骨芽細胞に分化誘導を行ったBMP-2含有培地にて培養したGFP陽性細胞は骨芽細胞分化マーカーの発現を認め、骨芽細胞に分化したことが示唆された。さらに、石灰化誘導培地にて培養を行ったところ、培養14日目にアリザリンレッド染色、Von Kossa染色に陽性な石灰化物の形成を認め、マウス毛包内の神経堤由来幹細胞から分化誘導した骨芽細胞様細胞による石灰化物の形成を確認した。

Cre/GFPダブルトランスジェニックマウス) をUsing the いてhair bag inside the の神経匴origin cell をした. The stem cells derived from the hair follicles are multiplied using a high-purity culture method. EGF-containing stem cells were cultured with Pedigree on the ground and cultured for 14 days with GFP More than 95% of positive cells are accounted for, and high-purity GFP-positive cells (Kamitsutsumi-derived cells) have been successfully cultured. Propagation and culture of GFP-positive cells using BMP-2 containing Pedigree, and induction of differentiation of bone bud cells using BMP-2 containing Pedigree The culture of GFP-positive cells and the differentiation of osteoblasts into osteoblasts were confirmed, and the differentiation of osteoblasts into osteoblasts was confirmed.さらに, lime-induced soil にて culture を行ったところ, 14-day culture にアリザリンレッド staining, Von The formation of calcified matter was confirmed by positive Kossa staining, and the formation of calcified matter was confirmed by induction of differentiation of stem cells from the stem cells in the hair follicles.