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神経堤幹細胞の多分化能を利用した新しい唇顎口蓋裂への治療方法の基盤構築

利用神经嵴干细胞的多能性为唇裂和腭裂的新治疗方法奠定基础

基本信息

批准号：
22K21023
负责人：
瀧澤秀臣
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21023/
关键词：
神経堤由来細胞神経堤幹細胞

项目摘要

１.神経堤由来細胞の多分化能解析(in vitro)成体にて容易に採取が行える神経堤由来細胞のソースとして毛包と口蓋粘膜の２箇所が検討される。そのため、P0-EGFPマウスより採取したEGFP陽性の毛包由来神経堤細胞、口蓋粘膜由来神経堤由来細胞を幹細胞増殖培地で増殖させた。それぞれの細胞の幹細胞としての性質をフローサイトメトリーで解析を行ったところ、両者とも幹細胞であることが認められた。幹細胞培地で培養増殖させた毛包由来の神経堤由来細胞をケラチノサイトおよび骨芽細胞へと分化誘導させた。骨芽細胞への分化誘導は計画した培養日数までの培養が行えず解析できていない。ケラチノサイト分化誘導培地での培養７日目、１４日目にそれぞれの細胞の性質の確認を蛍光免疫染色およびqPCRにて解析した。蛍光免疫染色ではKeratin 13、Keratin 14陽性の細胞が培養７日目および１４日目にて認められた。qPCRでは培養１４日目にてKeratin13およびKeratin14遺伝子発現の傾向が認められたが、信頼性のおける十分な結果は得られていない。ケラチノサイトへの分化誘導に関し、再度検証実験を行い十分な確認を行う。２.移植用粘膜細胞シートおよび骨補填剤の作製神経堤由来細胞のソースおよびケラチノサイト、骨芽細胞への分化誘導の検証が不十分なため、移植用組織の作製へ着手できていない。今後、毛包由来神経堤由来細胞にてケラチノサイトへの分化が検証され次第、移植用組織の作製に着手する。

1. Multi-differentiation of the origin of the dike can be analyzed (in vitro). It is easy for adults to take the dike from the dike. The origin of the dike and the mucous membrane of the mouth, the origin of the dike, the origin of the cell, the cell, the culture ground, the origin, the origin. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. The origin of the hair bag is the origin of the cell culture, the origin of the hair bag, the origin of the dike, the differentiation of bone buds, the differentiation of bone buds, and the differentiation of bone buds. The differentiation of bone bud cells led the planning of the number of days of culture, and the number of days of culture. The cells were cultured for 7 days and 14 days. The cells were confirmed by light immunostaining and qPCR was analyzed. The cells of Keratin 13 and Keratin 14 were cultured for 7 days and 14 days. On the 14th day of the qPCR training program, the results showed that there was a significant increase in the number of Keratin13 symptoms, and that the results showed that the symptoms were not good. Please make sure that you are not sure that you will be able to differentiate your leadership and make sure that you will do so again. two。 The transplantation was filled with mucous membrane and bone marrow, which was used as the diaphragm, the differentiation of bone germ cells led by the differentiation of bone germ cells, and the tissue tissue was used for transplantation. From now on, the origin of the bag is due to the differentiation of the tissue, and the tissue is used for transplant.