オプトジェネティクスを用いた咀嚼ー唾液分泌機構の解明

利用光遗传学阐明咀嚼唾液分泌机制

• 批准号: 22K21047
• 负责人: 梶原 里紗
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21047/
• 关键词: Phox2b; パッチクランプ; 唾液分泌; オプトジェネティクス; ニューロン; 咀嚼; 神経メカニズム

生後2-7日齢のラットにイソフルラン麻酔を行い、口腔底を切開し舌神経を剖出した。その後、ニューロン標識物質が注入されたガラス管を用いて、舌神経にニューロン標識物質を注入する。標識物質が脳に到達する期間を持った後に、脳幹スライス標本を作製し、舌神経を介して標識された上唾液核ニューロンからパッチクランプ記録を行った。予備実験で行った、Phox2b陽性ニューロンが豊富に存在する上唾液核周辺を、グルタミン酸のレーザー光解離を使った微小刺激法を用いるとやはり上唾液核ニューロンに応答がみられた。当実験を何回か行い、確かに上唾液核周辺を刺激すると、上唾液ニューロンに反応があったことを確認した。さらに、Phox2b陽性ニューロンにVenusと光感受性タンパク質のChRFR(光照射でニューロンを興奮させる)が発現する遺伝子改変ラット（Phox2b-ChRFRラット）を用いて、同様に舌神経にニューロン標識物質を注入後、脳幹スライス標本を作製した。そして、上唾液核ニューロンからパッチクランプ記録を行い、Venusの発現を指標に、上唾液核を興奮させる上唾液核駆動Phox2bニューロンが存在するであろう範囲を、オプトジェネティクス（光遺伝学的手法）と二光子レーザー顕微鏡を利用して、Phox2b陽性ニューロンを一つ一つ刺激し、上唾液核ニューロンに応答が生じるか行ったところ反応があった。以上より、上唾液核駆動Phox2bニューロンの存在が確認できた。今後は、脳幹内の上唾液核駆動Phox2bニューロンの局在範囲を解析する必要があり、さらには上唾液核駆動Phox2bニューロンが見つかれば、そのニューロンからもパッチクランプ記録を行い、相互間で実際に刺激と反応が認められるかを解析する必要がある。

2-7 days after birth, the oral cavity is cut open and the tongue is dissected. After the injection of the marker substance into the tube, the marker substance into the tongue is injected. After the identification substance arrives, it will be recorded in the saliva core. In order to prepare for the operation of Phox2b, there is a high level of activity in the upper salivary nucleus. When you go back to the middle of the day, you're going to have to go back to the middle of the day. Phox 2b-ChRFR (Phox 2b-ChRFR) is used to detect the presence of Phox 2b-ChRFR, and Phox2b-ChRFR is used to detect the presence of Phox2b-ChRFR. The upper salivary nucleus is excited, the Phox 2b is excited, the Phox 2b 2b 2b is excited, the The existence of Phox2b in the above mentioned saliva nucleus is confirmed. In the future, it is necessary to analyze the upper saliva nuclear motion Phox 2b in the trunk, and now it is necessary to analyze the upper saliva nuclear motion Phox2b in the trunk.

项目成果

Intrinsic properties and synaptic connectivity of Phox2b-expressing neurons in rat rostral parvocellular reticular formation

大鼠嘴侧小细胞网状结构中表达 Phox2b 的神经元的内在特性和突触连接

• DOI: 10.1016/j.neures.2021.12.009
• 发表时间: 2021
• 期刊: Neuroscience Research
• 影响因子: 2.9
• 作者: Kajiwara Risa;Nakamura Shiro;Ikeda Keiko;Onimaru Hiroshi;Yoshida Atsushi;Tsutsumi Yumi;Nakayama Kiyomi;Mochizuki Ayako;Dantsuji Masanori;Nishimura Akiko;Tachikawa Satoshi;Iijima Takehiko;Inoue Tomio
• 通讯作者: Inoue Tomio

公開討論2:Pros＆Cons <全麻か 鎮静か> 症例３：重度嘔吐反射の多数歯う蝕

公众讨论2：利与弊 <全麻或镇静> 病例3：多发龋且呕吐反射严重

• 发表时间: 2022
• 作者: 菊地大輔;梶原里紗;渥美広子;大塩葵;西原理恵;松野栄莉佳;西村晶子;飯島毅彦;梶原里紗
• 通讯作者: 梶原里紗

Physiological and morphological characterization of Phox2b-expressing neurons in the rat rostral parvocellular reticular formation

大鼠嘴侧小细胞网状结构中表达 Phox2b 的神经元的生理和形态学特征

• 发表时间: 2022
• 作者: Kajiwara R;Nakamura S;Ikeda K;Onimaru H;Yoshida A;Tsutsumi Y;Nakayama K;Mochizuki A;Dantsuji M;Iijima T;Inoue T
• 通讯作者: Inoue T

経鼻挿管における術後嗄声の発生率と症例検討

经鼻插管术后声音嘶哑的发生率及病例分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 菊地大輔;梶原里紗;渥美広子;大塩葵;西原理恵;松野栄莉佳;西村晶子;飯島毅彦
• 通讯作者: 飯島毅彦