致死的虚血下における脊髄運動ニューロン再生法の開発

致死性缺血下脊髓运动神经元再生方法的发展

• 批准号: 15591464
• 负责人: 櫻井 雅浩
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15591464/
• 关键词: 脊髄運動ニューロン; アポトーシス; 脊髄虚血

一過性脊髄虚血負荷後のbHLH型転写因子をマーカーとして神経幹細胞の存在と、運動ニューロン死のメカニズムを解明することを目的として、一過性脊髄虚血モデル(ウサギ)を用いてSham-control群、Sham-control-BrdU(ShamB)投与群、15分間脊髄虚血群の3群を作成した。ShamB群には屠殺7日前より途方性カプセルを用いてBrdUを投与した(3mg/day)。15分間脊髄虚血群は虚血負荷7日前より、ShamB群と同様に途方性カプセルを用いてBrdUを投与し(3mg/day)、虚血負荷後8時間、1日、2日、7日、14日後に屠殺し脊髄を摘出した。15分間の脊髄虚血により、虚血後7日後には脊髄運動ニューロンがアポトーシスにより有意に減少することはわれわれの研究により報告済みであるので、このアポトーシスによる運動ニューロン死がおこっている間に、神経細胞の再生がおこっているかを細胞の増殖、移動、分化の3段階で検討した。細胞の増殖はBrdUを、移動はPSA-NCAMを、分化についてはNeuNをそれぞれマーカーとして用いて、免疫組織染色、蛍光免疫二重組織染色によって再生がおこっているかを検討し、さらにウエスタンブロット法を用いてそれぞれの蛋白発現量の測定を試みた。現時点において再生がおこっているかの同定はなされていないが、平成16年度においてさらに細胞内の抗アポトーシスシグナルの発現についての考察も含めて検討を進めていく。

After transient spinal marrow blood virtual load の bHLH type planning write factor を マ ー カ ー と し て god 経 stem cells have と の, sports ニ ュ ー ロ ン die の メ カ ニ ズ ム を interpret す る こ と を purpose と し て, transient spinal marrow deficiency blood モ デ ル (ウ サ ギ) を with い て Sham control group, Sham - control - BrdU (Sha mB) Inoculated with groups, 15 minutes of spinal cord deficiency blood groups, and 3 groups of を to form a た. Seven days before the ShamB group 's に に massacre, よ よ <s:1> randomly カプセ を を を used を てBrdUを to throw at た た(3mg/day). 15 points between spinal marrow blood deficiency of blood は virtual load 7 よ り, と ShamB group with others in に way part カ プ セ ル を with い て BrdU を cast with し (3 mg/day), 8 time after holding blood load, 1, 2, 7, 14 later に slaughter し ridge marrow を pick the し た. 15 points between の spinal marrow blood deficiency に よ り, virtual 7 days after the blood に は spinal marrow movement ニ ュ ー ロ ン が ア ポ ト ー シ ス に よ り intentionally に reduce す る こ と は わ れ わ れ の research に よ り report 済 み で あ る の で, こ の ア ポ ト ー シ ス に よ る movement ニ ュ ー ロ ン die が お こ っ て い る に, god 経 cell regeneration が の お こ っ て い る か を cells の raised colonization Move, differentiate <s:1> 3-stage で検 to claim た. Cell の raised colonization は BrdU を, mobile は PSA - NCAM を, differentiation に つ い て は NeuN を そ れ ぞ れ マ ー カ ー と し て in い て, immunohistochemical staining, 蛍 light immune double tissue staining に よ っ て regeneration が お こ っ て い る か を beg し 検, さ ら に ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ を ト method using い て そ れ ぞ れ の protein 発 の is quantity determination を try Youdaoplaceholder0. Now point に お い て regeneration が お こ っ て い る か の with fixed は な さ れ て い な い が, pp.47-53 16 year に お い て さ ら の に cell resistance ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル の 発 now に つ い て の investigation も containing め て beg を 検 into め て い く.