霊長類消化管オルガノイドを用いたホルモンと神経伝達物質の検出法の確立

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本研究計画では、初年度に（1）霊長類消化管オルガノイドの作製と分化誘導系の構築を行い、並行して（2）マイクロデバイスの開発を開始することになっている。まず、旧京都大学霊長類研究所（現京都大学ヒト行動進化研究センター）にて小腸を採取し、東京農業大学にてオルガノイドを作製した。次に、様々な条件検討を行い、培地中から増殖因子を減らした上で、Notchシグナルの阻害剤であるDBZを添加することで内分泌細胞への分化誘導が促進されることがGIP、GLP-1、Motilin、Somatostatinなどのペプチドホルモン産生を調べることにより確認された。研究ペースが想定よりも早いため、3年目に予定していた単層培養系の構築を初年度に行った。まず、三次元である消化管オルガノイドを単層培養系にすることを試み、部分的に成功させた。しかし、単層培養の効率は高くないため、単層培養時の細胞状態や培養皿の表面処理について試験を繰り返し最適な条件を模索している。マイクロデバイスの開発は、コラーゲンゲルで中空構造を作製しその微小環境にオルガノイドが安定的に存在できるかを確かめた。現在までに、オルガノイドを完全にコラーゲン内の中空構造に配置できていないが、オルガノイドはコラーゲンゲル内に1週間ほど保持されることが確認されている。マイクロデバイスは手作りのため、3Dプリンターを使って試作を繰り返し、CO2インキュベーターの中でも形状が崩れず、灌流系に耐えうるマイクロデバイスの構築を目指している。