呼吸器ウイルス感染におけるMAIT細胞の炎症コントロール機能の解析

本研究ではRSウイルスを用い、我々が構築したMAIT細胞が豊富なMAITマウスとMAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞を使用して、ウイルス感染の病態におけるMAIT細胞の役割を解明する。当初の研究計画では、当該年度はRSウイルス感染モデルを確立する予定であった。しかし、予定していた実験室を移動することにより、新規に感染実験室の整備が必要となったので、以下の実験材料の作製と条件検討を行った。1. 感染実験用ウイルスストックの作製：RSウイルスA2株ならびにインフルエンザウイルスPR8株をATCCから入手し、それぞれHEp2細胞、MDCK細胞によりウイルスを増殖させた。プラークアッセイにより感染力価を測定し、分注して-80度に保存した。2. MAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞の分化誘導：OP9/DLL1細胞をフィーダー細胞として用い、マウスMAIT-iPS細胞を播種し、T細胞へと分化誘導を行った。分化初期のMAIT細胞は後の実験で用いるため、凍結保存をした。3. BALB/c系MAITマウスの作製の検討：C57BL/6よりBALB/cの方がウイルス感染感受性が高いため、BALB/c系のMAIT細胞が多い新たなマウスモデルを作製するために、10週令のBALB/cの肺からMAIT細胞を分離精製し、iPS細胞を作製する検討を開始した。BALB/cではC57BL/6以上にMAIT細胞が少ないことがわかり、MAIT細胞をまずin vivoで増殖する方法を確立することが必要であることがわかった。

本研究ではRSウイルスを用い、我々が構築したMAIT細胞が豊富なMAITマウスとMAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞を使用して、ウイルス感染の病態におけるMAIT細胞の役割を解明する。当初の研究計画では、当該年度はRSウイルス感染モデルを確立する予定であった。しかし、予定していた実験室を移動することにより、新規に感染実験室の整備が必要となったので、以下の実験材料の作製と条件検討を行った。1. 感染実験用ウイルスストックの作製：RSウイルスA2株ならびにインフルエンザウイルスPR8株をATCCから入手し、それぞれHEp2細胞、MDCK細胞によりウイルスを増殖させた。プラークアッセイにより感染力価を測定し、分注して-80度に保存した。2. MAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞の分化誘導：OP9/DLL1細胞をフィーダー細胞として用い、マウスMAIT-iPS細胞を播種し、T細胞へと分化誘導を行った。分化初期のMAIT細胞は後の実験で用いるため、凍結保存をした。3. BALB/c系MAITマウスの作製の検討：C57BL/6よりBALB/cの方がウイルス感染感受性が高いため、BALB/c系のMAIT細胞が多い新たなマウスモデルを作製するために、10週令のBALB/cの肺からMAIT細胞を分離精製し、iPS細胞を作製する検討を開始した。BALB/cではC57BL/6以上にMAIT細胞が少ないことがわかり、MAIT細胞をまずin vivoで増殖する方法を確立することが必要であることがわかった。