呼吸器ウイルス感染におけるMAIT細胞の炎症コントロール機能の解析

MAIT细胞在呼吸道病毒感染中的炎症控制功能分析

• 批准号: 22H02542
• 负责人: 杉本 智恵
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02542/
• 关键词: 自然免疫型T細胞; ウイルス感染; 呼吸器; 感染免疫

本研究ではRSウイルスを用い、我々が構築したMAIT細胞が豊富なMAITマウスとMAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞を使用して、ウイルス感染の病態におけるMAIT細胞の役割を解明する。当初の研究計画では、当該年度はRSウイルス感染モデルを確立する予定であった。しかし、予定していた実験室を移動することにより、新規に感染実験室の整備が必要となったので、以下の実験材料の作製と条件検討を行った。1. 感染実験用ウイルスストックの作製：RSウイルスA2株ならびにインフルエンザウイルスPR8株をATCCから入手し、それぞれHEp2細胞、MDCK細胞によりウイルスを増殖させた。プラークアッセイにより感染力価を測定し、分注して-80度に保存した。2. MAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞の分化誘導：OP9/DLL1細胞をフィーダー細胞として用い、マウスMAIT-iPS細胞を播種し、T細胞へと分化誘導を行った。分化初期のMAIT細胞は後の実験で用いるため、凍結保存をした。3. BALB/c系MAITマウスの作製の検討：C57BL/6よりBALB/cの方がウイルス感染感受性が高いため、BALB/c系のMAIT細胞が多い新たなマウスモデルを作製するために、10週令のBALB/cの肺からMAIT細胞を分離精製し、iPS細胞を作製する検討を開始した。BALB/cではC57BL/6以上にMAIT細胞が少ないことがわかり、MAIT細胞をまずin vivoで増殖する方法を確立することが必要であることがわかった。

This study で は RS ウ イ ル ス を い, I 々 が build し た MAIT cells が aboundant な MAIT マ ウ ス と MAIT - iPS cell origin reMAIT を use し て, ウ イ ル ス infection の pathological に お け る MAIT cells cut を の service interpret す る. The original <s:1> research plan で であった and when the annual <s:1> RSウ <s:1> ス ス ス ス infection モデ を を を were established する set であった. し か し, designated し て い た be 験 chamber を mobile す る こ と に よ り, new rules に infection be 験 chamber の servicing が necessary と な っ た の で, the following の be 験 materials の system line 検 と conditions for を っ た. 1. The infection be 験 with ウ イ ル ス ス ト ッ ク の cropping: RS ウ イ ル ス A2 strains な ら び に イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス を PR8 strain ATCC か ら し and そ れ ぞ れ HEp2 cells, MDCK cells に よ り ウ イ ル ス を raised colonization さ せ た. Youdaoplaceholder0 プラ アッセ アッセ によ によ 価を infectious disease 価を determination に sub-injection に て-80 degrees に preservation た た. 2. Origin reMAIT MAIT - iPS cells の induction: OP9 / DLL1 cells を フ ィ ー ダ ー cells と し て い, マ ウ ス MAIT を seeding し - iPS cells, T cells へ と induction line を っ た. In the early stage of differentiation, <s:1> MAIT cells are used in the later stage of <s:1> experimentation で with で るため and frozen for preservation at を た た. 3. BALB/c series MAIT ウス ウス production 検 discuss: C57BL / 6 よ り BALB/c の party が ウ イ ル ス infection sensitivity high が い た め, BALB/c の MAIT cells が い new た な マ ウ ス モ デ ル を cropping す る た め に, 10 weeks の BALB/c の lung か ら を MAIT cells separation system of refined し, iPS cells を す る を 検 please start し た. BALB/c で は C57BL / 6 above に MAIT cells less が な い こ と が わ か り, MAIT cells を ま ず in vivo で す rights colonization を る method established す る こ と が necessary で あ る こ と が わ か っ た.