Spectroscopic analysis of phase-separated liquid droplets made from low-complexity sequences
由低复杂性序列制成的相分离液滴的光谱分析
基本信息
- 批准号:22H02594
- 负责人:
- 金额:$ 11.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
加藤グループは、FUS LCDの野生体とALS変異体deltaS57、deltaG174G175を精製し、塩やバッファー成分を含まない濃縮溶液条件から、他のグループの測定条件に最適なバッファー条件下で、温度降下によって相分離液滴を形成させる条件検討し、その系を確立した。そしてそのサンプルを各グループに提供した。中川グループは、加藤グループから提供された、36℃から5℃に温度を下げると相分離をするFUS LCD試料について、日本原子力研究開発機構のJRR-3原子炉に設置されてある中性子小角散乱装置で測定を行った。その結果、液滴形成により野生型では慣性半径が変化する一方で、変異体では変化しない傾向が見られた。今後はシグナルの精度を上げるため、試料の濃度を上げることで再度実験を実施する予定である。藤井グループでは、溶液試料の温度を室温から10℃程度に降温することで、液液相分離を示すFUS LCD試料について、放射光VUV-CDスペクトルの測定を継続して行っている。これまでに温度変化によるCDスペクトル強度の変化を観測したものの、相分離に伴う構造変化によるものかどうかについては判明していない。今後は試料純度の向上を目指したうえでCDスペクトルの測定を実施する予定である。中林グループでは、ラマンおよび自家蛍光顕微鏡を用いたラベルフリーでの液滴構造解析を検討した。ラマンイメージングについては、FUS LCDおよびその変異体、さらにFUS全長の単一液滴状態でのラマン測定に成功した。温度コントロールによって作成したFUS LCの液滴は、変異によるラマンスペクトルの変化は観測されず、液滴内のタンパク質の二次構造に顕著な違いが無いことがわかった。自家蛍光については、紫外励起自家蛍光寿命顕微鏡を製作し、FUS LCD内のチロシンを用いて自家蛍光寿命および異方性測定が行えることを確認した。
Kato, FUS LCD wild body and ALS variant deltaS57, deltaG174G175 were purified, the components were concentrated in the solution conditions, the determination conditions of other species were optimized, the conditions for the formation of phase separation droplets were discussed, and the system was established. All right, so we're going to have to do something about it. FUS LCD sample preparation, JRR-3 atomic furnace setup of Japan Atomic Energy Research and Development Agency As a result, droplet formation tends to change in the wild type and in the variant. In the future, the accuracy of the sample will be improved, and the concentration of the sample will be improved. Fujii test sample temperature from room temperature to 10℃, temperature drop, liquid-liquid phase separation, FUS LCD test sample temperature, radiation VUV-CD test sample measurement The temperature changes, the intensity changes, the phase separation changes, the structural changes, the phase separation changes. In the future, the purity of the sample will be determined according to the requirements of the standard. A study of droplet structure analysis using optical micromirrors The FUS LCD panel is different from the FUS panel, and the FUS panel is different from the FUS panel. The temperature of the liquid droplets of the FUS LC is different from that of the liquid droplets of the FUS LC. Home illumination, UV excitation, home illumination lifetime, micro-mirror fabrication, FUS LCD application, home illumination lifetime and anisotropy measurement
项目成果
期刊论文数量(19)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Mutations linked to neurological disease enhance self-association of low-complexity protein sequences.
- DOI:10.1126/science.abn5582
- 发表时间:2022-07
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
TDP43-LCドメインの病原性変異と線維形成能の網羅的解析
TDP43-LC结构域致病突变及纤维化能力综合分析
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:松田颯真;長尾聡;山田大智;久保稔;中林孝和;Yuji GOTO;真板宣夫,梶野裕子,加藤昌人
- 通讯作者:真板宣夫,梶野裕子,加藤昌人
Low-complexity配列に特異的に作用する低分子化合物 - biotinylated isoxazoleと1,6-hexanediol
特异性作用于低复杂性序列的低分子化合物——生物素化异恶唑和1,6-己二醇
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Nakajima Kichitaro;Yamaguchi Keiichi;Noji Masahiro;Aguirre Cesar;Ikenaka Kensuke;Mochizuki Hideki;Zhou Lianjie;Ogi Hirotsugu;Ito Toru;Narita Ichiei;Gejyo Fumitake;Naiki Hironobu;Yamamoto Suguru;Goto Yuji;加藤昌人;加藤昌人
- 通讯作者:加藤昌人
単一液滴内のラベルフリー濃度測定からみた液液相分離と分子夾雑環境
从单滴内无标记浓度测量看到的液-液相分离和分子污染环境
- DOI:
- 发表时间:2023
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:山本真也;中林孝和
- 通讯作者:中林孝和
Water in a living cell probed by a Raman microscopy
用拉曼显微镜探测活细胞中的水
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Emi Kawano-Yamashita;Nanaho Yura;Mitsumasa Koyanagi;Seiji Wada;Akihisa Terakita;Satoshi Tamotsu;山本真也;Takakazu Nakabayashi
- 通讯作者:Takakazu Nakabayashi
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加藤 昌人其他文献
VUV-CDによるFUS-LCの相分離転移に伴う二次構造変化の観測
使用 VUV-CD 观察与 FUS-LC 相分离转变相关的二级结构变化
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
藤井 健太郎;真板 宣夫;加藤 昌人;松尾 光一 - 通讯作者:
松尾 光一
加藤 昌人的其他文献
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- 批准号:
23K23857 - 财政年份:2024
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$ 11.15万 - 项目类别:
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$ 11.15万 - 项目类别:
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$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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RNA和染色体骨架蛋白引起的液-液相分离现象促进M期染色体控制
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- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
核内タンパク質の液液相分離によるB型肝炎ウイルス複製制御機構の解明
通过核蛋白液-液相分离阐明乙型肝炎病毒复制控制机制
- 批准号:
23K27118 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
液・液相分離による病的な液滴形成と神経変性疾患発症におけるタンパク質凝集化の亢進
神经退行性疾病发展过程中液-液相分离和蛋白质聚集增强导致病理性液滴形成
- 批准号:
24K10494 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
生体模倣設計による核小体液―液相分離を標的とした抗がん性ポリマーの開発
通过仿生设计开发靶向核仁液-液相分离的抗癌聚合物
- 批准号:
24K15747 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
天然変性領域の液-液相分離アノテーション
自然修饰区域的液-液相分离注释
- 批准号:
24K15181 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
液-液相分離による液滴からのアミロイド形成が抑制される細胞内機構
液-液相分离抑制液滴形成淀粉样蛋白的细胞内机制
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24K09363 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)