ウイルスRNA鎖を識別する蛋白質とその分子機構

识别病毒RNA链的蛋白质及其分子机制

• 批准号: 04272207
• 负责人: 福田 龍二
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04272207/
• 关键词: RNA結合蛋白質; インフルエンザウイルス; NS1蛋白質; パンハンドル構造; 分子生物学

マイナス鎖RNAウイルスの1つ、インフルエンザウイルスのゲノムは8本に分節しており、各分節は末端共通塩基配列の部分的相補性によりパンハンドル構造をしている。感染細胞内では各分節に少なくとも三種類のRNA(ゲノムRNA,複製の鋳型RNA,mRNA)が存在し、これらのRNA識別は非常に複雑であると考えられる。我々はこのウイルスのNS1蛋白質がRNA鎖識別能を持つ事を発見した。NS1はウイルス粒子構成成分ではないが、感染細胞中で比較的大量に産生され細胞核に局在する。ウイルス増殖には必須の蛋白質であるが、その機能はいまだに同定されていない。NS1蛋白質は、全分節のゲノムRNA((-)鎖)の5′と3′末端に存在する10数塩基の共通配列にそれぞれ個別に結合する事ができる((-)鎖単一末端配列結合)。しかし、(+)鎖の鋳型RNAやmRNAには結合できない。試験管内でパンハンドル構造をとると推定されるミニゲノムRNAを作りNS1の結合性を調べると、高次構造(多分パンハンドル構造)依存性に強い安定な結合が観察された。一方、NS1は二本鎖RNAにも強く結合し、この場合は塩基配列特異性を示さなかった。結合の強さは、ミニゲノムRNA>二本鎖RNA>>(-)鎖単一末端配列、の順序であり、前二者への結合は温度非依存性であるが、三番目の結合は依存性であった。ミニゲノムRNAへの強い結合のためには、パンハンドル構造から突出するシングルAバルジ構造の存在が重要であった。また、NS1がゲノムRNAのパンハンドル構造形成を促進する結果を得た。NS1蛋白質の示すこれら三様のRNA結合能が、ウイルス感染においてはたす役割について解析中である。

The structure of RNA is complementary to the structure of RNA in 8 segments and the common base arrangement at the end of each segment There are three kinds of RNA(RNA, RNA,mRNA) in infected cells. The NS1 protein can be used to identify RNA locks. NS1 has a relatively large number of particle components, and the infected cells produce a relatively large number of nuclei. The protein that is essential for the development of the disease is not present in the body. The NS1 protein has a total of 10 amino acid residues at the 5′ and 3′ termini of the RNA((-) lock), and a total of 10 amino acid residues at the 5 ′ and 3 ′ termini of the RNA (-) lock). (+)-lock RNA and mRNA binding. In this paper, we try to estimate the structure of NS1 in the tube, and observe the dependence of NS1 on higher order structure (multiple structure). One side, NS1, two core RNA binding, and in this case, the base alignment specificity is shown. The binding of the first two sequences is temperature independent and the binding of the third sequence is temperature dependent. The existence of strong RNA binding structures is important. NS1 promotes the formation of RNA and DNA structures. The expression of NS1 protein in the three components of RNA binding energy, infection, and analysis

项目成果

Eriko Hatada: "Binding of influenza A virus NS1 protein to dsRNA in vitro" Journal of General Virology. 73. 3325-3329 (1992)

Eriko Hatada：“甲型流感病毒 NS1 蛋白与 dsRNA 的体外结合”《普通病毒学杂志》。

Eriko Hatada: "Specific binding of influenza A virus NS1 protein to the virus minus-sense RNA in vitro" Journal of General Virology. 73. 17-25 (1992)

Eriko Hatada：“甲型流感病毒 NS1 蛋白在体外与病毒负义 RNA 的特异性结合”《普通病毒学杂志》。

Kazue Enami: "An influenza virus temperature-sensitive mutant defective in the nuclear-cytoplasmic transport of the negative-sense viral RNAs" Virology. (1993)

Kazue Enami：“一种流感病毒温度敏感突变体，其负义病毒 RNA 的核胞质运输存在缺陷”病毒学。