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転写開始複合体の機能構造とCRPの作用機構

转录起始复合物的功能结构及CRP的作用机制

基本信息

批准号：
09249207
负责人：
餐場弘二
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09249207/
关键词：
転写調節 CRP プロモーター転写開始複合体 RNA polymerase UPエレメントヘパリン

项目摘要

大腸菌の転写因子であるCRPはRNAポリメラーゼとの相互作用およびDNA構造変化を誘起することにより転写を促進させる。CRPの作用機構(作用点)はCRP結合部位の相対的位置により異なることが速度論的解析から示唆されてきたが、昨年度までに、代表的な3種のCRP依存プロモーターの転写活性化にCRPは共通して活性型転写開始複合体の形成までに寄与しており、それ以降の転写反応には必要ないことを明らかにした。この過程で、malTプロモーターではCRP非存在下においてもRNAポリメラーゼがヘパリン耐性転写複合体を形成することを見いだした。今年度は転写開始複合体形成に着目してその生化学的性質とCRPの作用について解析を行った。malTプロモーターにおけるCRP非依存のヘパリン耐性転写複合体はabortiveRNA合成能を有するがrun-offRNA合成能を欠損した不活型転写複合体であった。この複合体はコアプロモーター上流のA/Tに富む領域(UP-like element)の結合様式がCRP依存の活性型転写複合体と異なることが明かとなった。UP-like elementの転写複合体形成とCRPの作用に対する役割を変異体を用いて解析した。その結果、このelementはコアプロモーターとの距離によっては不活型転写開始複合体を形成させるシグナルともなること、CRPによる転写活性化にこの領域が必要であることなどが明らかとなった。即ち、CRPはUP elementとRNAポリメラーゼとの相互作用を調節することにより不活型から活性型転写開始複合体の形成を促進しmalTプロモーターの転写を活性化すると結論した。

E. coli transcription factors are expressed in CRP, RNA, DNA, and DNA. CRP binding mechanism (point of action) CRP binding site of the relative position of different, this is the speed theory of analysis, yesterday's analysis, the representative of the three CRP dependent on the formation of CRP common active type of writing start complex is necessary to reduce the writing reverse. In the absence of CRP, the process of RNA transcription and the formation of a resistant transcription complex are described. This year, the formation of the complex begins with the analysis of the biochemical properties of CRP. CRP-independent RNA synthesis complex has run-off RNA synthesis capacity and inactive RNA synthesis capacity. A/T up-stream UP-like element of the complex is a CRP-dependent active-type complex. UP-like element complex formation and CRP function in the analysis of the role of different species As a result of this, the distance between the elements and the inactive writing start complex is necessary for the formation of the active writing field. That is to say, CRP regulates the interaction between UP element and RNA, and promotes the formation of active writing initiation complex.