ヒト胃癌細胞株を用いたリンパ節転移機序の解析と転移阻害治療法の開発

人胃癌细胞系淋巴结转移机制分析及转移抑制治疗进展

• 批准号: 14571213
• 负责人: 山口 浩司
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14571213/
• 关键词: 同所性移植; リンパ節転移; VEGF-C遺伝子; 胃癌; DNAマイクロアレイ

リンパ節転移に対する新しい治療法の開発に向け、転移の分子機序の解明が望まれており、臨床研究のためにも良い動物モデルの確立が課題のひとつとなっている。本件研究では種々のヒト胃癌細胞株を用いたリンパ節転移モデルからリンパ節転移成立に特異的に関与する因子、遺伝子を同定し、それらを抑制・制御することにより、ヒト胃癌外科治療における臨床応用の可能性を探索するものである。胃癌細胞株AZ521 5×10^6/0.1mlの細胞浮遊液をマウス胃壁に接種する細胞注入法を用い同所性移植を施行した。移植するマウスは生後6-7週、体重16-20gの雌(BALB/c Ajcl-nu)を用いた。リンパ節転移巣の転移細胞を培養しAZL1Gを樹立した。さらに上記のことを4回繰り返しAZL5Gを樹立した。以下、親株との比較検討を行った。1.移植腫瘍の転移率:AZL5Gのリンパ節転移率は85.0%であった。2.細胞増殖能:in vivoではAZL5Gは明らかにAZ521の増殖能を上回った。3.細胞運動能:AZL5GはAZ521に比し亢進を認めた。4.接着分子の発現:FACSによる解析では、AZL5Gではα_1、α_2インテグリンの発現が亢進していた。5.細胞接着能:AZL5Gはtype IV collagen、fibronectin に対する接着能が亢進していた(P<0.05)。6.血管新生因子産生量:VEGFの産生量ではAZL5Gは親株と差を認めなかった。7.VEGF-C遺伝子の発現:AZL5GにおいてのみVEGF-Cの発現が認められた。DNAマイクロアレイにより転移関連因子の発現を遺伝レベルで検討すると、AZL5Gではendothelin-A receptor、TGF-beta II R alphaなどのup-regulated geneであった。これらの遺伝子群が単独でリンパ節転移に与える影響については、一定の結果を得られなかった。

The development of novel therapeutic methods for the treatment of cancer and the elucidation of the molecular mechanism of cancer are expected to lead to the development of clinical research and the establishment of a good animal model. This study explores the possibility of clinical use of gastric cancer cell lines in vitro and in vivo. Gastric cancer cell line AZ521 5×10^6/0.1ml cell suspension was inoculated into the stomach wall by cell injection method Female (BALB/c Ajcl-nu) 6-7 weeks after transplantation weighing 16-20g. AZL1G was established in vitro. The AZL5G was built on the same day. The following is a comparative study of parents. 1. Transplantation tumor migration rate:AZL5G migration rate 85.0% 2. Cell proliferation:in vivo, AZL5G and AZ521 can be used for cell proliferation. 3. Cell motility:AZL5G AZ521 4. Next, the molecular development:FACS analysis, AZL5G, α_1, α_2, α_3, α_4, α_5, α_6, α_7, α_8, α_9, α_ 5. Cell adhesion:AZL5G, type IV collagen, fibronectin, and cell adhesion increased significantly (P<0.05). 6. Angiogenic factor production: The production of VEGF is different from that of AZL5G. 7.VEGF-C gene discovery:AZL5G gene discovery. The gene expression profile of AZL5G and endothelin-A receptor, TGF-beta II R alpha and up-regulated gene were analyzed. The result of this study is that there is no difference between the results of the study and those of the study.

项目成果

Furuhata T.et al.: "Expression of VEGF-C and VEGF-D mRNA levels using real-time quantitative RT-PCR in lymph node matastasis of human gastric cancer."Thmor Res.. 37. 33-40 (2002)

Furuhata T.等人：“使用实时定量 RT-PCR 在人胃癌淋巴结转移中表达 VEGF-C 和 VEGF-D mRNA 水平。”Thmor Res.. 37. 33-40 (2002)

Yasoshima T. et al.: "Identification of differentially expressed genes and biological malignancies associated with the differences in hematogenous, peritoneal, and lymph node metastasis of gastric cancer"XXXIII World Congress of the International College

Yasoshima T.等：“与胃癌血行、腹膜和淋巴结转移差异相关的差异表达基因和生物恶性肿瘤的鉴定”第三十三届国际学院世界大会

Kawakami M. et al.: "Quantification of vascular endothelial growth factor-C and its receptor-3 messenger RNA with real-time quantitative polymerase chain reaction as a predictor of lymph node metastasis in human colorectal cancer"Surgery. 133. 300-308 (20

Kawakami M.等人：“利用实时定量聚合酶链反应定量血管内皮生长因子-C及其受体3信使RNA作为人类结直肠癌淋巴结转移的预测因子”手术。

Kawakami M.et al.: "Quantification of vascular endothelial growth factor-C and its recepter-3 messenger RNA with real-time quantitative polymerase chain reaction as a predictor of lymph node metastasis in human colorectal cancer."Surgery. 133. 300-308 (20

Kawakami M.等人：“利用实时定量聚合酶链反应对血管内皮生长因子-C 及其受体 3 信使 RNA 进行定量，作为人类结直肠癌淋巴结转移的预测因子。”手术。

Furuhata T. et al.: "Expression of VEGF-C and VEGF-D mRNA levels using real-time quantitative RT-PCR in lymph node matastasis of human gastric cancer"Tumor Res.. 37. 33-40 (2002)

Furuhata T.等：“在人胃癌淋巴结转移中使用实时定量RT-PCR表达VEGF-C和VEGF-D mRNA水平”Tumor Res.. 37. 33-40 (2002)