チトクロ-ムP-450・アロマタ-ゼの生理機能と発現制御機構の解析

细胞色素P-450和芳香酶的生理功能及表达调控机制分析

• 批准号: 01635510
• 负责人: 原田 信広
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01635510/
• 关键词: エストロゲン合成酵素; アロマタ-ゼcDNA; アロマタ-ゼ遺伝子; チトクロ-ムP-450; 3T3-L1細胞; BeWo細胞

チトクロ-ムp-450AROM(アロマタ-ゼ)は女性ホルモン生合成における律速酵素で、従来より生植器・ホルモン産生臓器での局在が知られていた。近年、脳・肝臓・脂肪組織など様々な組織・臓器への局在性及び種々の因子による複雑な発現制御機構が注目されるようになった。本研究では、分子生物学的手法を用いることによりアロマタ-ゼの持つ多様な生理機能を明らかにすると共に、その複雑な発現制御を遺伝子上での転写調節として解析していく。既にヒト胎盤よりアロマタ-ゼを精製し、そのユニ-クな蛋白化学的性質を明らかにした。また特異的抗体を用いることによりヒト・アロマタ-ゼ完全長cDNAを単離し、その全DNA塩基配列を決定した。このcDNAをプロ-ブとしてラットの各種臓器でのアロマタ-ゼ発現についてノ-ザン解析を行った。脳・肝臓を始めとして様々な臓器でその発現が見られたが、用いたプロ-ブはヒト・アロマタ-ゼcDNAなので、ラット及びマウスのアロマタ-ゼcDNAの単離を行っている。またアロマタ-ゼ蛋白をさらに詳しく解析する目的で、アロマタ-ゼの酵母菌体内での発現を行い、成功した。現在、酵母菌体から発現したアロマタ-ゼの大量調製を行っている。またアロマタ-ゼ遺伝子の発現制御機構を解析する目的で、アロマタ-ゼ遺伝子をヒト胎盤染色体DNAライブラリ-より単離した。全長70kb以上で10個のエクソンと9個のイントロンから成り、他のチトクロ-ムp-450と比較してユニ-クな遺伝子構造が明らかになった。アロマタ-ゼ遺伝子の多様な因子による発現調節機構を解析する目的で、その5'-プロモ-タ-領域をCAT遺伝子を含むレポ-タ-ベクタ-に組み込れだ。3T3-LI細胞及びBeWo細胞などを用いて、そのプロモ-タ-活性を測ることにより、各種の発現調節因子と遺伝子上の発現調節部位との相互作用について解析中である。

You can synthesize tachyzymes in your body by using the p-450AROM system. You can use the plant generator to synthesize the enzyme. In recent years, the fat tissue of the liver and the organ management department have paid close attention to the replication of sex and a variety of factors. In this study, the methods of molecular biology were used to use the physiological mechanism of multi-agent to understand how to share and copy the information on the computer. There is a clear understanding of the nature of the protein chemistry of the fetus. The specific antibodies were determined by the complete growth of cDNA isolates and the determination of antibodies based on the whole DNA. This is the first time that you have a problem. You will not be able to parse the cDNA. Please tell me that you need to know that you are not going to have any trouble, and that you need to know that you are in a bad situation. Please do not know what to do. Please do not know what to do. Please tell me that you are not aware of the situation. Please tell me that the cDNA is not available. The purpose of this study was to determine the activity and success of the yeast in vivo. At present, the yeast cells show that there are a large number of bacteria in the yeast cell. The imperial organ will analyze the purpose, the DNA, the fetus, the chromosome of the fetus, the mother, the mother, the mother, Over the full-length 70kb, nine of the 10-year-old and above-the-whole-length Ten-year-olds and the other-over-the-top 10-year-olds and nine-year-olds have become obtainable, and other customers have made more information about the price of their lives than those of other countries. The target information is analyzed by the computer system. The purpose of the CAT is analyzed by the computer system, and the target is analyzed. 3T3-LI cells and BeWo cells were used in the analysis of the interaction between the two parts of the cell, and in the analysis of the interaction between the observed parts of the cells and the cells of the BeWo cells.

项目成果

Nobuhiro Harada: "STRUCTURAL CHARACTERIZATION OF THE HUMAN ESTROGEN SYNTHETASE(AROMATASE)GENE" BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS. 166. 365-372 (1990)

Nobuhiro Harada：“人类雌激素合成酶（芳香酶）基因的结构特征”生物化学和生物物理研究通讯。