Pー450_<11β>による反応の多様性と多段階反応

P-450_<11β>引起的反应多样性和多步反应

• 批准号: 02217206
• 负责人: 須原 克子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02217206/
• 关键词: Pー450; Pー450_<11β>; ステロイド18位水酸化反応; ステロイド11β位水酸化反応; ステロイド18位酸化反応

本研究はブタ副腎皮質ミトコンドリアの精製Pー450_<11β>を用い、触媒する反応の多様性と多段階反応の機構をすべて精製酵素タンパク質(アドレノドキシン、アドレノドキシン還元酵素)による再構成系によって酵素次元で解析したものである。Pー450_<11β>はC_<21>ーステロイドであるデオキシコルチコステロン、11ーデオキシコルチゾ-ルの11βー位を水酸化し、グルココルチコイドであるコルチコステロンとコルチゾ-ル生成するが、コルチコステロンの18位をさらに水酸化、酸化しミネラロコルチコイドであるアルドステロンを生成することが明らかになっている。このことから、Pー450_<11β>は、コルチゾ-ルの18位の水酸化、酸化も触媒し18ーヒドロキシンーおよび18ーオキシ体を生成することが予想される。そこで、精製Pー450_<11β>を用いてこれらのステロイドの生合成機構を調べることを目的とした。11ーデオキシコルチゾ-ルまたはコルチゾ-ルを基質としてPー450_<11β>と反応系を再構成し、一定時間反応させ抽出したステロイドをHPLC、TLCで分析した。得られた2つの未知の生成物はNMR、GCーMSにより18ーヒドロキシーおよび18ーオキソコルチゾ-ルと同定された。さらに、11ーデオキシコルチゾ-ルからは、18ーヒドロキシー11ーデオキシコルチゾ-ルも同定され、11ーデオキシコルチゾ-ルを出発としたPー450_<11β>の多段階反応による代謝経路が明らかになった。これらのステロイドは原発性アルドステロン症の要因ステロイドとして注目され、18ーオキソコルチゾ-ルはアルドステロンの1%のミネラロコルチコイド活性、コルチゾ-ルの3%のグルココルチコイド活性をもつstructural hybrid steroidといわれている。組織スライスを用いた実験により副腎で合成されることが示唆されていたが、本研究はPー450_<11β>がこれらのステロイドの生合成反応に関与していることを明らかした。

In this study, the mechanism of multi-stage and multi-stage reaction in the purification of P-450_<11β> in the adrenal cortex was studied. P-450_&lt;11β&gt; is hydrated and acidified at the 11β position of the C_<21>(11) gene, and the 18-position of the C_(11) gene is hydrated and acidified to produce the C_(11) gene. This is the first time that the P-450_&lt;11β&gt; has been used to acidify and acidify the 18-position water of the catalyst. For example, if you want to improve your product quality, you can use it to improve your product quality. 11. The reaction system was reconstituted and extracted for a certain period of time by HPLC and TLC. The results of NMR, GC and MS of 2 unknown compounds were analyzed. 11 ° C ° C ° C The main causes of this disease are: 18 ° C, 18 ° C, 1% C, 3% C, 3% C, and structural hybrid steroid. In this study, we found that the gene expression of P450 was related to the gene expression of P450.

项目成果

Hideo Mochizuki,Katsuko Suhara,Masayuki Katagiri: "Adrenal Pー450scc Catalyzes Deoxycorticosterone 6βーHydroxylase Reaction" Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. 37. 133-136 (1990)

Hideo Mochizuki、Katsuko Suhara、Masayuki Katagiri：“肾上腺 P-450scc 催化脱氧皮质酮 6β-羟化酶反应”类固醇生物化学和分子生物学杂志 37. 133-136 (1990)。

Katsuko Suhara,Minoru Yamamoto,Masayuki,Katagiri: "Hydroxylation of 19ーNorandrostenedione by Adrenal Cortex Mitochondrial Pー450_<11β>" Journal of Steroid Biochemistry. 36. 361-367 (1990)

Katsuko Suhara、Minoru Yamamoto、Masayuki、Katagiri：“肾上腺皮质线粒体 P-450_<11β> 的 19-去甲雄烯二酮的羟基化”类固醇生物化学杂志 36. 361-367 (1990)。