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中枢神経シナプス剤終末カルシウム濃度のレ-ザ-顕微鏡を用いた直接測定

使用激光显微镜直接测量中枢神经突触末端钙浓度

基本信息

批准号：
03225205
负责人：
河西春郎
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03225205/
关键词：
レ-ザ-顕微鏡シナプス剤終末 Ca画像処理

项目摘要

研究実施計画に従い、海馬スライス標本の特に苔状線維にCa感受性色素を負荷した後、Ca上昇を捉える試みを行ったが、シナプスが小さく色素の蛍光強度を十分にあげることにまだ成功していない。備品として購入した防震台はシナプス電位を低ノイズで記録するのに有効に使用している。そこで、この様な困難を解決し、研究の目的を達成するために、脊椎動物のシナプスの中で格段に大きく、また扱い易い鶏胚毛様体神経節の杯型シナプスを用いることを試みた。この研究には、同じ重点領域の班員である八尾寛(京大)と共同で行った。その結果、この標本はCaイメ-ジングをするのに絶好の標本であることがわかった。Ca感受性色素は動眼神経の切断端より注入し、逆行性輸送によってシナプス終末に特異的に負荷した。こうして、動眼神経を吸引電極により一回刺激すると、その刺激に伴うCa上昇が観察された。現在まで、シナプス終末のCaイメ-ジングを行った研究は幾つかあるが、それらの標本では、Ca上昇を捉えるのには頻回刺激が必要で、実際にシナプス伝達の時間経過とCa上昇を直接対応させることのできる本実験系はこれが初めてである。この解析の結果、シナプス局所のCa濃度は刺激後2ミリ秒以内にピ-クに達し、その上昇は500ミリ秒程も持続することがわかった。また、頻回刺激を行うとこのCaの上昇は蓄積し、持続も数秒に延長した。更に、この標本のシナプス小胞をRH414でラベルしたところ、頻回刺激によってこの蛍光が減少し、小胞の放出を直接モニタ-できることも明かとなった。この様に、この標本はシナプス機能の研究に絶好であることがわかってきたので、今後更に、平均加算を用いた詳細なCa上昇の解析や細胞内CaストアからのCa動員の検討を行っていく予定である。

After studying the moss-like Ca receptive pigments on the Ca, the light intensity of the pigments on the Ca was very high. The equipment is imported into the shock-proof station, the electricity level is low, the records are recorded, and the equipment is used. The purpose of the study is to change the size of the body, the body and the body. We will conduct joint research sessions and work together with members of the key field class to conduct joint meetings in Beijing University. The result of the test, the Ca of the header, the header The Ca receptive pigment was injected into the cutting end of the eye, and was retrograded to the end of the body. Try to attract electricity to stimulate and stimulate each other in conjunction with the monitoring on the Ca. Now, at the end of the day, you can use the Ca to conduct research. You need to use the database, the logo, the Ca, the necessary stimulus, and the Ca. You can use the Ca to directly register the registration of your computer. The results were analyzed, and within 2 seconds after the local Ca stimulation, the temperature was measured within 2 seconds, and the clock duration was 500 seconds. In response to the stimulus, you will accumulate money on the Ca and hold it for a few seconds to prolong the cycle. In addition, the tag book does not show that the small cells are RH414, the response stimulation is the light, the light is less, and the small cells are emitted directly. In this paper, we will be able to conduct research on how to improve the accuracy of the research. In the future, we will make changes in the future, and the average cost will be increased. On the Ca, we will analyze the intracellular Ca signals, and the Ca operators will be able to determine the accuracy of the data.