質量分析法による大きな糖質の構造解析,タンパク質との相互作用及び糖包接錯体の解明

通过质谱法对大碳水化合物进行结构分析，阐明与蛋白质和糖包合物的相互作用

• 批准号: 06240247
• 负责人: 大橋 陽子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06240247/
• 关键词: 複合糖質; 酸性糖脂質; ESIMS; FABMS; CID-MS; MS; 特異的非共有結合; ルイス型酸性複合糖質; 糖包接錯体

1.研究の目的:質量分析法を用いて糖鎖とタンパク質との特異的相互作用を解明すること.われわれはこれを(1)タンパク質と相互作用をする糖鎖(リガンドあるいは受容体)の構造解析,(2)特異的非共有結合によるコンプレクスの検出,(3)糖包接錯体の三項目に大別して研究を進めている.(1):本年度著しい進展をなし得たのは本課題である.すなわち従来のイオン化法では質量分析が困難であったポリシアロガングリオシド類について,30μmol程度の試料を用いてESIMS CID-MS/MSをおこない,構造異性体の区別ができることを示した.さらにセレクチンのリガンドとして注目されているポリスルフォおよびシアロ型ルイス系複合糖質について,Le^xとLe^aを区別する方法を見いだし,これまでNMRで解析していた結合位置異性を質量分析法によれば更に微量で見分け得る可能性を示した.またコンドロイチン硫酸,デルマタン硫酸およびヘパリン・ヘパラン硫酸系糖質についてFABMS CID-MS/MSにより硫酸基の結合位置を決める方法を確立した.(2):糖鎖とタンパク質との非共有結合コンプレクスについてはコレラトキシンB-サブユニットとGMlaを例としてESIMS法で検出できているが、特異的結合であることの証明は継続課題とする.この課題についてはレクチンと特異的に相互作用する糖鎖とのコンプレクスも研究対象としているが、レクチン自体および糖質自体のESIMS測定は容易であるが,コンプレクスのESI測定は現在のところ,凝集作用が測定に対する最大の難関となっている.(3):糖包接錯体の研究についてはゲストの光学異性の検討を含めて来年度の継続課題とする.2.新課題:ESI CID-MS/MS法を用いて酸性Le系糖鎖におけるCa^<2+>の結合位置を特定する方法をも併せて研究中である.

1. Objective: quantitative analysis is used to understand the interaction between sugar and sugar. The main results are as follows: (1) the analysis of the interaction between two kinds of sugar, (2) the combination of non-common components, and (3) the progress of the study on the three major objectives of sugar packaging. (1): this year's progress has been made in this project. In this paper, the chemical method is used to determine the accuracy of the quantitative analysis. the temperature of the material is 30 μ mol, the temperature is 30 μ mol, and the ESIMS CID-MS/MS is used. In this paper, we pay close attention to the fact that there is a complex sugar complex in the system, and that the method of NMR analysis combined with position analysis shows that it is possible to obtain more accurate results. Sulfuric acid in the presence of sulfuric acid. Sulfuric acid, sulfuric acid, sulfuric acid, The combination of special information shows how to solve the problem. In this paper, the interaction of sugar, sugar The effect of agglutination is very important. (3): the study of the wrong body of sugar packaging includes the study of optical properties. 2. New topic: the ESI CID-MS/MS method is based on the combination of acidic Le carbohydrate, Ca ^ & lt;2+>, and a specific method is used in the study.

项目成果

Tadashi Ii: "Structural elucidation of underivatized gangliosides by electrospray ionization tandem spectrometry(ESI MS/MS)." Carbohydr.Res.(in press).

Tadashi Ii：“通过电喷雾电离串联光谱法 (ESI MS/MS) 阐明未衍生化神经节苷脂的结构。”

Tadashi Ii: "FAB CID-MS/MS characterization of tetrasaccharide tri-and tetrasulfate derived from the antigenic determinant recognized by anti-chondroitin sulfate monoclonal antibody MO-225." Glycoconjugate J.(in press).

Tadashi Ii：“来自抗硫酸软骨素单克隆抗体 MO-225 识别的抗原决定簇的四糖三硫酸盐和四硫酸盐的 FAB CID-MS/MS 表征。”

Tadashi Ii: "Negative-ion Fast Atom Bombardment Tandem Mass Spectrometry for Characterization of Sulfated Unsaturated Disaccharides from Heparin and Heparan Sulfate." Glycoconjugate J.(in press).

Tadashi Ii：“负离子快原子轰击串联质谱法表征肝素和硫酸乙酰肝素的硫酸化不饱和二糖。”

Tadashi Ii: "Positive-ion fast atom bombardment tandem mass spectrometry for characterization of sulfated unsaturated disaccharides from heparin and heparan sulfate." European Mass Spectrometry. (in press).

Tadashi Ii：“正离子快原子轰击串联质谱法表征肝素和硫酸乙酰肝素的硫酸化不饱和二糖。”

Tadashi Ii: "Tandem Mass Spectrometry for Characterization of Unsaturated Disaccharides from Chondroitin Sulfate,Dermatan Sulfate and Hyaluronan." Glycoconjugate J.11. 123-132 (1994)

Tadashi Ii：“串联质谱法表征硫酸软骨素、硫酸皮肤素和透明质酸的不饱和二糖。”