アルドラーゼをモデル系とするアイソザイムの組織特異的機能獲得の分子機構の研究

以醛缩酶为模型系统研究同工酶获得组织特异性功能的分子机制

• 批准号: 07265224
• 负责人: 堀 勝治
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07265224/
• 关键词: アイソザイム; アルドラーゼ; キメラ分子; 酵素; 組織特異性; 分子進化; 解糖系

脊椎動物アルドラーゼには組織特異的に機能する3種類のアイソザイムA型(筋型),B型(肝型),C型(脳型)がある。これらのアイソザイムは機能する組織の糖代謝ならびにエネルギー代謝上の必要性から2つの基質fructose-1,6-bisphosphate (FB)とfructose-l-phosphate (FlP)に対する動力学的挙動が著しく異なっている。われわれはアルドラーゼ分子上に各アイソザイム固有の配列(IGS)が4カ所存在すること、A型-B型間のキメラ酵素の機能解析の結果からA型の特性を表すためにはIGS-1と4が不可欠であることをすでに報告しているが、本研究ではB型-C型間、A型-C型のキメラ酵素を用いて機能解析を行なった。その結果、A型と同様、B型とC型も主にIGS-1と4がアイソザイム固有の特性を担っていることが明らかになった。キイロショウジョウバエのアルドラーゼは単一遺伝子からカルボキシル末端領域の31個のアミノ酸配列に対応する3つのエキソンを選択的に使い分けることによって、3種類のアイソザイム(アルドラーゼα,β,γ)をつくりだしている。われわれは大腸菌発現系を使ってこの3つのアイソザイムをつくり、各アイソザイムの動力学的性質を解析した。その結果、この3つの酵素は二つの基質に対する特異性、二つの基質に対する活性比、基質との親和性、組織分布等に関して相互に異なっていることが確かめられた。これらの性質の差は選択的スプライシングによって使い分けられた領域の配列の差に起因するが、この領域は脊椎動物アルドラーゼのIGS-4に対応する。このことは脊椎動物以前の生物においても脊椎動物のIGSに対応する配列が酵素の特異性の決定に関わっていることを示しており、アイソザイムの機能獲得にこれらの配列が関わっていることを実験的に証明することができた。

The special tissue of spinal animals can be classified as type A (tendon type), type B (liver type) and type C (type C). The machine can organize the necessary information on the basis of fructose-1,6-bisphosphate (FB) fructose-l-phosphate (FlP) mechanical mechanics. It is necessary to analyze the results of the innate equipment allocation (IGS) of each type of equipment, type A-B, type A, type An and type B. the results show that the characteristic table of type A can be used to analyze the performance of IGS-1 4, and the results of this study are as follows: type B-C, type B-C. The enzyme of type A-C was analyzed by the machine. The results show that type An is the same, type B, type C is the main IGS-1, and the inherent characteristics of type C are related to each other. Each of the 31 sub-markets in the end of the market is assigned to each of the 31 sub-stations in the end of the market. The selected ones are the ones that have been selected, such as the ones that have been selected, and the ones that have been selected. This is the analysis of the characteristics of the dynamics of the bacteria. The results, the specificity, the activity ratio, the compatibility, the tissue distribution and so on of the three enzymes are closely related to each other. The selected cause of error is related to IGS-4 vertebrae. In the past, bioassay was used to determine the activity of enzymes in IGS vertebrae. The enzyme-specific device was used to determine the activity of enzymes. The device was used to determine the activity of the vertebrae. The machine was able to make sure that the device was equipped with the device that was used in the laboratory.

项目成果

Zhang Rong: "Drosophila melanogaster Aldolase : Characterization of the lsozymes α,β,γ Generated from a Single Gene." Journal of Biochemistry. 118. 183-188 (1995)

张荣：“果蝇醛缩酶：单基因产生的溶菌酶的表征。生物化学杂志”118。183-188（1995）

Zhang Rong: "Structures of cDNAs Encoding the Muscle-Type and Non-Muscle-Type lsozymes of Lamprey Fructose-1,6-Bisphosphate Aldolases and the Evolution of Aldolase Genes." Journal of Biochemistry. 117. 545-553 (1995)

张蓉：“编码七鳃鳗果糖-1,6-二磷酸醛缩酶肌肉型和非肌肉型溶酶体的cDNA结构和醛缩酶基因的进化”。