ターミナルフラワー等花器分化に関する遺伝子の構造と機能及び普遍性に関する研究

顶花等花器官分化相关基因的结构、功能及共性研究

• 批准号: 07281211
• 负责人: 本吉 總男
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07281211/
• 关键词: シロイヌナズナ; ターミナルフラワー; TFL1; FISH; アナロバクテリウム; T-DNA

シロイヌナズナの茎頂の生長点の機能の維持に関与しているとされる遺伝子TFL1の内部または近傍にアグロバクテリウムに由来するT-DNAが挿入されることによって生じたと考えられるターミナルフラワー突然変異体ともとの野生型植物を素材にして研究を行った。T-DNAおよび5SrDNAをプローブとする染色体の蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)では、T-DNAは第5染色体の先端にT-DNAのシグナルが観察され、連鎖地図上のTFL1の位置と矛盾しない結果が得られた。次に、回収されたT-DNAに近接するDNA領域の断片をプローブとして野生型植物のゲノムDNAライブラリーから選択された15kbのDNAクローン内部のTFL1を含むと推定される8kbの塩基配列を決定し、ORFおよびプロモーターの検索を行った。その結果、この領域には、5′側にTFL1以外の遺伝子のORFと推定されるもののほか、TFL1を構成する4個のORFが推定された。その最も5′側の推定ORFはATGで始まり、またその上流にTATAボックスと思われる配列が存在したので、第1エクソンと考えられた。また、この推定第1エクソンの5′端から、上流に存在する上記の別の遺伝子までの距離は約2.5kbであり、この中に推定TFL1遺伝子のプロモーターが存在すると考えられる。この推定TFL1遺伝子の全長を知るため、cDNAライブラリーおよびポリ(A)RNAを鋳型とし、ゲノムDNAの一部の配列またはベクターの配列に基くプライマーとポリTプライマーを用いてPCRを行った結果、転写される領域は約700bpと推定された。データベースによるホモロジー検索では、この遺伝子と似た配列をもつ遺伝子は見当たらなかった。

The study of T-DNA insertion into the plant material of wild type plants was carried out in order to maintain the function of the growth point of the plant apex. T-DNA and 5S rDNA were detected by FISH at the top of chromosome 5, and the position of TFL1 on the linkage site was contradictory. The sequence of DNA fragments in the T-DNA region was determined by DNA sequencing in wild-type plants. The sequence of DNA fragments in the TFL1 region was estimated to be 8kb. As a result, ORF of genes other than TFL1 on the 5′ side of the domain were estimated. The putative ORF on the 5'-side of the ATG is the first to exist, and the upstream is the first to exist. The distance between the 5′ end of the putative TFL1 gene and the 5 ′ end of the putative TFL1 gene is about 2.5kb. The full length of the putative TFL1 gene was determined by PCR, cDNA sequencing and sequencing (A)RNA sequencing and sequencing of a portion of the DNA sequence. PCR results showed that the putative region was approximately 700bp. The name of the child is the name of the child, and the name of the child is the name of the child.