機能性核酸DNA複合体形成によるシンクロナイゼーション活性化

通过功能性核酸-DNA复合物形成的同步激活

• 批准号: 13022250
• 负责人: 佐々木 茂貴
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13022250/
• 关键词: オリゴヌクレオチド; 遺伝子発現阻害; アンチセンス; アンチジーン; クロスリンク; 2-aminopurine誘導体; 機能性核酸

背景:合成オリゴヌクレオチドは生体内においてmRNAあるいは2本鎖DNAと複合体を形成することによって、特異的に遺伝子発現阻害を行うことが可能であり、アンチセンス、アンチジーン法として新時代の医薬品への発展が期待されている。高い阻害効率を実現するため、これらの複合体の安定化が必要であり、特に、機能性核酸を利用した核酸間を共有結合で固定化するクロスリンク反応の適用が検討されている。我々は、効率的かつ特異的な反応が、目的の標的部位でのみ活性化される分子の開発を目指し、標的核酸との複合体形成→活性化→クロスリンク反応と一連の反応がシンクロナイズして誘起される、新規機能性核酸誘導体の開発を目指している。結果:標的塩基をシチジンとし、高い塩基選択性を実現するため、認識構造と反応部位を同一分子内に持つ機能性核酸2-アミノ-6-ビニルプリン誘導体を設計した。このビニル基を2本鎖DNA内で効率よく発生する安定前駆体としてフェニルスルフォキシド体、ならびにフェニルスルフィド体を用いることによって、「シンクロナイゼーション活性化」機構による機能発現を立案した。フェニルスルフォキシド体を組み込んだオリゴDNAは効率的なクロスリンクを実現した。シンクロナイゼーション活性化概念を最も理想的な形で実現したのはフェニルスルフィド体(X=2-COOH)であった。つまり、この分子は非常に安定でチオールやアミンなどの強い求核剤とは全く反応しないが、相補的DNAとのハイブリダイゼーションによって速やかにクロスリンクを形成した。二本鎖内でシトシンのアミノ基とカルボキシル基によるpush-pull機構による活性化によりビニル基が再生し、引き続きクロスリンク反応が起こったものと考えられる。上記の検討によって、二本鎖内での分子シンクロ活性化の概念を確立した。さらに反応効率の高いダブル活性化構造を開発することもできた。現在これらのin vivoへの利用を計画中である。遺伝子そのものへの特異的反応を実現するため三本鎖形成クロスリンク反応を検討した。三本鎖の遠い側のフリップアウトした塩基に接近させるためエチルおよびブチルスペーサーで糖部に連結した化合物を用いて検討したところ、エチルスペーサー化合物はTA塩基対のアデニンとブチルスペーサー化合物はGC塩基対のシトシンと非常に高い選択性で反応することが明らかになった。

Background: The synthesis of DNA in vivo is expected to result in the development of new era medical drugs. The stability of the complex is necessary for the realization of high resistance efficiency, especially for the utilization of functional nucleic acids, and for the immobilization of nucleic acids. The target site of the target molecule is activated, the target nucleic acid complex is formed, the target nucleic acid complex is activated, the target nucleic acid complex is induced, and the target nucleic acid inducer is developed. Results: Target gene expression, high level gene selectivity, recognition structure and anti-gene site were realized in the same molecule, and functional nucleic acid 2-expression-6-expression inducer was designed. The functional development of the mechanism of "activation of DNA" in the presence of a stable precursor, a stable precursor, and a stable precursor is reported. The DNA sequence is displayed on the screen. The concept of activation of a compound is realized in the most ideal form (X=2-COOH). This molecule is very stable, and it's very strong. It's very strong. Two lock inside the lock to open the base to open the push-pull mechanism to activate the base to regenerate, lead to open the base to open the door to open the door to open The concept of molecular activation in the above study was established. This is the first time that the active structure has been developed. Now we're in vivo. The unique reaction of the three locks is discussed. Three of the lock's far side of the ring is the base of the ring. The ring is close to the ring.

项目成果

Nagatsugi, Fumi; Matsuyama, Yoshihisa; Maeda, Minoru; Sasaki, Shigeki.: "Selective Cross-linking to the Adenine of the TA Interrupting Site within Homopurin-Homopyrimidine Duplex.."Bioorg & Med. Chem Lett.. 12. 487-489 (2002)

长木文；

Taniguchi, Yushuke, Takahashi, Ryo, Kodama, Keiji, Senko Yusuke, Maeda, Minoru, Sasaki, Shigeki: "Selective formation of non-natural type triplexes containing TA interrupting sites with the TFO incorporating W-shape nucleic acid (WNA) analogs"Nucleic Acid

Taniguchi、Yushuke、Takahashi、Ryo、Kodama、Keiji、Senko Yusuke、Maeda、Minoru、Sasaki、Shigeki：“使用掺有 W 形核酸 (WNA) 类似物的 TFO 选择性形成含有 TA 中断位点的非天然型三链体”

Nagatsugi, Fumi, Usui, Daisaku, Kawasaki, Takeshi, Maeda, Minoru, Sasaki, Shigeki: "Selective Reaction to a Flipping Cytidine of the Duplex DNA Mediated by Triple Helix Formation"Bioorg & Med.Chem Lett.. 11(3). 343-345 (2001)

Nagatsugi、Fumi、Usui、Daisaku、Kawasaki、Takeshi、Maeda、Minoru、Sasaki、Shigeki：“对三螺旋形成介导的双链 DNA 翻转胞苷的选择性反应”Bioorg

Sasaki, S., Yamauchi, H., Nagatsugi, F., Takahashi, R., Taniguchi, Y., Minoru M.: "W-Shape Nucleic Acid (WNA) for Selective Formation of Non-Natural Anti-Parallel Triplex Including a TA Interrupting Site"Tetrahedron Letters. 42(39). 6915-6918 (2001)

Sasaki, S.、Yamauchi, H.、Nagatsugi, F.、Takahashi, R.、Taniguchi, Y.、Minoru M.：“用于选择性形成非天然反平行三链体的 W 形核酸（WNA），包括

Nagatsugi, Fumi, Tokuda, Natsuko, Maeda, Minoru, Sasaki, Shigeki: "A New Reactive Nucleoside Analog for Highly Reactive and Selective Cross-linking Reaction to Cytidine Under Neutral Conditions"Bioorg & Med.Chem Lett.. 11(19). 2577-2579 (2001)

Nagatsugi、Fumi、Tokuda、Natsuko、Maeda、Minoru、Sasaki、Shigeki：“一种新的反应性核苷类似物，可在中性条件下与胞苷进行高度反应性和选择性交联反应”Bioorg