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ショウジョウバエの味覚受容分子機構の網羅的解析

果蝇味觉受体分子机制综合分析

基本信息

批准号：
14011237
负责人：
谷村禎一
金额：
$ 3.52万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ショウジョウバエの味覚受容に関わる遺伝子を網羅的に同定するために、Genechipを用いたスクリーニングを行った。味覚感覚器が機械感覚器に転換したpoxn突然変異体と野生型の味覚器官由来のtotal RNAからプローブを作製した。ショウジョウバエの全遺伝子を含むGenechipにプローブをハイブリダイズし、poxn突然変異体で野生型よりも発現量が有意に低下している遺伝子をスクリーニングした。その結果、野生型と比較して2371個の遺伝子がpox突然変異体で発現が低下していた。このうち、Gタンパク質共役型受容体が15個、チャンネルが24個、Gタンパク質が7個などが見つかった。これらの遺伝子の機能を同定するために、GAL4/UAS systemを用いて目的遺伝子のpromoter近傍ゲノム領域にP{GAL4}が挿入した系統を用いて遺伝子の発現場所を同定し、数個の遺伝子について詳細な解析を開始した。多数のGal4系統とUAS-GFP系統を交配し、GFPの発現をもとに感覚子の基部の味細胞でGAL4が発現している系統をスクリーニングしNP1017系統を得た。anti-GFPを用いた抗体染色や、LSMの観察により、この系統では、感覚子基部の1個の味細胞でGAL4が発現していた。この味細胞の機能を調べるため、高温下でシナプス小胞のリサイクルが抑制されるshibire^<ts1>をGAL4発現細胞で発現させることができるUAS-shibire^<ts1>用いた吻伸展反射行動実験を行った。その結果、高温条件下で、糖や塩に対する応答は正常であったが水に対する応答が著しく低下した。水応答の異常は、K^+チャネルの遺伝子であるShakerの突然変異遺伝子を連結したUAS-EKO系統を用いた電気生理学的解析でも示された。NP1017系統を用い、水受容細胞から中枢への投射パターンを観察したところ、食道下神経節、胸部神経節において、水受容細胞はそれぞれ特定の領域に投射していることが明らかになった。本研究により、ショウジョウバエの水受容細胞を機能と関連づけて同定することができ、その中枢への投射を明らかにすることができた。

Please check that you are not allowed to subscribe to the subscriber account of the subnetwork, and Genechip will use the same license as the subscriber. The taste sensor, the mechanical sensor, the mechanical sensor, the poxn, the total RNA sensor, the mechanical sensor, the machine sensor, the The whole child contains the word Genechip, the wild type, the wild type, the quantity, the intentional low, the son, the mother, the baby, the mother, the child, the child. According to the results of the test, the pox of 2371 wild-type samples suddenly showed a low level of health. There are 15 joint service recipients, 24 public health care facilities, and 7 public health care facilities. You can use the promoter sub-machine to determine the same location, and GAL4/UAS system to use the target sub-server promoter nearby domain P {GAL4} to transfer to the same location where you can use it, and to start the analysis of several sub-systems. Most Gal4 systems, UAS-GFP systems, mating systems, GFP systems, and GAL4 systems show that there is a significant difference in the quality of the NP1017 system. Anti-GFP was stained with antibody, LSM was used to detect the virus, and one taste cell at the base of the receptor was detected by GAL4. The odor cell can be used to reduce the temperature, the temperature is very high, and the temperature is very high. Under high temperature, the cell temperature is reduced and the temperature is reduced. The lt;ts1> GAL4 shows that the temperature is affected by the temperature, the temperature, the temperature, The results of the test, the temperature at high temperature, the temperature of sugar and sugar, the temperature, temperature The water supply response is very common, and the K^ + temperature response is due to the sudden failure of the Shaker system to analyze the physiology of the UAS-EKO system by computer physiology. The NP1017 system is used, the water-receptive cell is used, and the central terminal is projected to detect the lung, the subesophagus, the chest, the water-receptive cell, the specific domain, and so on. The purpose of this study is to determine the accuracy of the water capacitance cell in the same way as that in the center of the study.