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スピンドルチェックポイントの制御機構-力計測・分子操作・顕微動態解析による研究-

主轴检查点的控制机制 - 利用力测量、分子操纵和微动力学分析进行研究 -

基本信息

批准号：
20058035
负责人：
板橋岳志
金额：
$ 3.9万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20058035/
关键词：
細胞分裂細胞骨格

项目摘要

生体をとりまく物理的な環境とその変動は、発生・分化・増殖など、多くの細胞の機能発現や制御機構に関わっている。本研究では、正確な染色体分配を制御するスピンドルチェックポイントの解除シグナルとなる、"物理的な力"を定量化することで、この"物理的なシグナル"から"生化学的シグナル"への伝達機構、及びそのフィードバック機構の制御を明らかにすることを目的としている。今年度は、アフリカツメガエル卵抽出液中で形成させた中期紡錘体へ、ガラス微小針を用いて様々な力学的負荷をかけた時の紡錘体の応答、キネトコア動態の変調について、GFPタグをつけたセントロメア及びキネトコア局在タンパク質のイメージングにより、キネトコア間距離の変化に注目して調査した。極間方向へ紡錘体を引き伸ばす力学的負荷は、キネトコア間距離を増加させると予測されていたが、同負荷を与えた際、減数分裂中期紡錘体の特異的な構造上、骨格である微小管同士にずれが発生するため、著しいキネトコア間距離の増加、及び動態の変化は観察されなかった。この際、生ずる微小管同士のずれ、及びそのずれを修復する際の微小管のダイナミクス変化(微小管量、紡錘体極方向への微小管の流れの速度変化等)について、学会にて発表した。また、ピエゾ抵抗カンチレバーを用いて、動物培養細胞中の中期紡錘体へ、力学的負荷をかけた際の有糸分裂中期進行とスピンドルチェックポイントへの影響を現在解析している。

The physical environment of living organisms is related to changes, development, differentiation, proliferation, and functional development of multiple cells. This study aims to clarify the mechanism of chromosome allocation control, quantification of "physical forces," and identification of "biochemical mechanisms." This year, the mid-term spindle is formed in the ovum aspirate, and the mechanical load of the micro-needle is applied. The response of the spindle and the change in the dynamics of the coyote are investigated. Attention is paid to the change in the distance between the coyote and the coyote when GFP is being removed from the coyote. The mechanical load of the spindle in the polar direction increases, and the distance between the poles increases. The load increases, and the distance between the poles increases. The load increases, and the distance between the poles increases, and the dynamic changes of the spindle in the structure and cell of the meiotic metaphase are observed. During this process, the micro-tubes are exposed, and the micro-tubes are repaired. The micro-tubes are changed (the micro-tube quantity, the spindle pole direction, the micro-tube flow velocity, etc.). The effects of metaphase spindle and mechanical loading on metaphase progression in cultured animal cells were analyzed.