ヒトiPS細胞を用いた、膠原病の末梢循環障害における血管内皮細胞の機能解析

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膠原病における末梢循環障害の発症機序は未だに不明であるが、過去の報告から血管内皮細胞に異常を来している可能性がある。しかしながらこれまでは、患者から血管内皮細胞を直接分離・培養し解析することは、困難であった。今回、我々は膠原病患者における血管内皮細胞の機能を解析し、膠原病患者における末梢循環障害の病態を明らかにすることを目的として、患者皮膚線維芽細胞からiPS細胞を作製し、iPS細胞から血管内皮細胞（iET細胞）を誘導することを考えた。まずは本研究に同意の得られた良性皮膚腫瘍切除時の皮膚生検の検体の一部から、皮膚線維芽細胞を単離し、piggybac transposon systemを利用した方法によってiPS細胞を樹立し、iET細胞へ分化させるプロトコールを確立した。フローサイトメトリでタンパクレベル、RT-PCRによってRNAレベルで血管内皮細胞の表面マーカであるCD31の発現を確認した。またiET細胞が、血管内皮様の管腔構造を形成することをtube forming assayにおいても確認した。現在、本研究に同意の得られた強皮症の症例でも、同様の方法を用いて皮膚生検の検体の一部から、皮膚線維芽細胞を単離し、iPS細胞を作製した上で、iET細胞を誘導しており、健常人と強皮症の症例からのiET細胞を用いて、その遺伝子発現などについて比較検討を行い、膠原病の末梢循環障害の発症機序解明に向けて研究を進めていく予定である。