5-アミノレブリン酸のHSP90阻害効果によるHER2陽性胃癌に対する新規治療法

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複数の胃癌細胞株に5-アミノレブリン酸(5-ALA)を投与し、細胞内へのProtoporphyrin 9(Pp9)の蓄積について検討した。HER2陽性胃癌細胞株（NCI-N87）とHER2陰性胃癌細胞株（MKN45・AGS）に1mMの5-ALAを投与し、24時間後に蛍光顕微鏡で観察したところNCIN87・MKN45では赤色蛍光を示し、AGSではほとんど赤色蛍光を示さなかった。Real-time PCRを用いて5-ALAを細胞内に取り込むトランスポーターであるPEPT-1のmRNA発現量を測定したところ、NCI-N87とMKN45はPEPT-1が強く発現し、AGSではほとんど発現を認めなかった。これらのことからNCI-N87・MKN45では5-ALAを投与すると、細胞内にPpIXが蓄積することが確認された。これら２つの細胞株に5-ALAを100uM～1mMで投与し、細胞増殖が抑制されるか検討した。HER2陽性胃癌（NCIN87)では濃度依存的に細胞増殖が抑制されたのに対して、HER2陰性胃癌（MKN45）では5-ALA投与による細胞増殖抑制効果は認められなかった。このことから、5-ALAはHER2陽性胃癌に特異的に作用していると考え、5-ALA投与時のHER2抑制効果について検討した。HER2陽性胃癌細胞株（NCI-N87）に5-ALAを100uM～3mMで投与し、24時間・48時間でタンパクを回収し、ウエスタンブロット法でHER2の抑制効果について検討した。5-ALAを3mMで投与した際のHER2タンパク質の発現・リン酸化はわずかに抑制されることもあったが、再現性に乏しかった。5-ALAによる細胞増殖抑制効果はHER2タンパクの抑制以外の機序が考えられた。上記結果を踏まえ本研究は終了とする。