がん抗原を外殻成分とした新規マイクロバブルの創製とがん免疫療法への応用

以癌抗原为外壳成分的新型微泡的制备及其在癌症免疫治疗中的应用

• 批准号: 16K21383
• 负责人: 小田 雄介
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K21383/
• 关键词: マイクロバブル; 超音波; 樹状細胞; がん免疫療法; 抗原送達

まずはじめに、モデル抗原として卵白アルブミン（OVA)を外殻成分としたマイクロバブルの調製法に関する検討を行った。動的光散乱法・コールターカウンター法・ガスクロマトグラフィにより、マイクロバブル粒子径・粒子数・気体成分の含有量を評価し、再現性良く抗原からなるマイクロバブル調整法を確立した。次に、本調製法により調製したマイクロバブルに超音波を照射した際の抗原の細胞内動態を検討した。アジ化ナトリウム処理したマウス骨髄由来樹状細胞にAlexa 488で蛍光ラベルしたOVAを組み込んだマイクロバブルを添加し、超音波照射後、直ちに細胞を洗浄し、共焦点レーザー顕微鏡にて観察した。その結果、OVAからなるマイクロバブルを添加し、超音波照射した樹状細胞において、細胞膜周辺にOVA由来の蛍光が観察された。このことから、抗原からなるマイクロバブルに超音波照射することで、エンドサイトーシス非依存的に細胞内に抗原送達可能であることが示唆された。次に、MHCクラスI抗原提示誘導について検討した。樹状細胞にOVAからなるマイクロバブルを添加し、超音波照射した。1時間培養後、細胞を洗浄し、樹状細胞のMHCクラスI上のOVAエピトープを認識し、IL-2を産生するCD8-OVA1.3細胞と共培養した。20時間培養後、培養上清に含まれるIL-2をELISAにより測定した。その結果、OVAからなるマイクロバブルに超音波を照射することで、高いIL-2産生が認められた。このことから、抗原からなるマイクロバブルに超音波照射することでMHCクラスI抗原提示を誘導可能であることが示唆された。

The preparation method of the shell component and the protein antigen are discussed. Dynamic light scattering method, particle size, particle number, and content of organic components are evaluated, and good reproducibility is established. In addition, this modulation method is used to investigate the intracellular dynamics of antigens when irradiated with ultrasound. After ultrasonic irradiation, the cells were washed and observed by confocal microscope. The results, OVA, UVA, UVA. The antigen can be delivered to cells independently of one another by ultrasonic irradiation. The second, MHC detection I antigen prompt induction detection Dendritic cells are irradiated with ultrasound. After 1-hour culture, CD8-OVA1.3 cells were co-cultured with CD8-OVA1.3 cells and CD8-OVA1.3 cells. After 20 hours of incubation, the supernatant contained IL-2, which was determined by ELISA. The results of ultrasound irradiation are as follows: The MHC antigen may be induced by ultrasonic irradiation.

项目成果

Validation of controllability of bubble liposome induction in blood flow under ultrasound field

超声场下气泡脂质体诱导血流可控性验证

• DOI: 10.3179/jjmu.jjmu.a.68
• 发表时间: 2016
• 期刊: Choonpa Igaku
• 作者: 小井土惇;和田 洸;保坂直斗;望月 剛;桝田晃司;小田雄介;鈴木 亮;丸山一雄
• 通讯作者: 丸山一雄

ナノバブルを用いた超音波セラノスティクスの構築

使用纳米气泡构建超声治疗诊断仪

• 发表时间: 2016
• 作者: 小田雄介;鈴木 亮;Unga Johan;小俣大樹;宇留賀仁史;杉井むつみ;宗像理沙;島 忠光;丸山一雄
• 通讯作者: 丸山一雄

Experimental analysis of behavior in nanobubbles using echograms under ultrasound exposure

使用超声波照射下的回波图对纳米气泡的行为进行实验分析

• DOI: 10.7567/jjap.55.07kf06
• 发表时间: 2016
• 期刊: Japanese Journal of Applied Physics
• 影响因子: 1.5
• 作者: Hikaru Wada;Jun Koido;Shinya Miyazawa;Takashi Mochizuki;Kohji Masuda;Johan Unga;Yusuke Oda;Ryo Suzuki and Kazuo Maruyama
• 通讯作者: Ryo Suzuki and Kazuo Maruyama

微小気泡を用いた新たな医療/診断システム－超音波セラノスティクス

使用微泡的新型医疗/诊断系统 - 超声波治疗诊断学

• 发表时间: 2016
• 期刊: バイオサイエンスとインダストリー
• 作者: 小田雄介;鈴木 亮;丸山一雄
• 通讯作者: 丸山一雄

帝京大学 薬学部 薬物送達学研究室

帝京大学药学部药物输送实验室