網羅的遺伝子解析手法を用いたゲフィチニブ耐性化機序の解明

利用综合遗传分析方法阐明吉非替尼耐药机制

• 批准号: 26860616
• 负责人: 寺井 秀樹
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26860616/
• 关键词: EGFR-TKI; DNAメチル化; epigenetics

資金責任者らが半年間の長期ゲフィチニブ曝露によってEGFR遺伝子陽性肺癌細胞株PC9より作成したゲフィチニブ耐性細胞株PC9 GRを用いてメチル化及びmRNAの網羅的解析を行った。その結果、感受性株と比較して耐性株においてDNAメチル化が亢進し、mRNAの発現が低下しており、メチル化の変化がゲフィチニブの耐性化との関与が考えられる遺伝子を候補遺伝子（s100p、klotho、c10orf116、RASSF1A、IGFBP3、）として同定した。さらにその候補遺伝子の中から、IGFBP3、klotoho、s100pを中心に解析を行った。結果としてわずかではあるが、klothoやs100pが耐性化に関与していることが考えられ、siRNAを用いたknock downによって感受性株がわずかに耐性化することが示唆された。ひとつひとつのメチル化に伴う耐性化への影響は少ないものの、多数集まることで細胞株の耐性化に寄与している可能性が考えられた。同結果について今後論文投稿予定としている。資金責任者の海外留学に伴い本科研費に基づく研究に関しては一旦終了となった。klothoに関しては、同細胞株の主要耐性化機序として報告済みのFGF2-FGFR1活性化との関与も考えられ、関連性について評価を予定している。また、既に解析を終えているHCC827肺癌細胞株での同様な解析と照らし合わせてより普遍性の高い実験を行っていく予定としている。

The person responsible for the funding was the long-term exposure of the EGFR gene-positive lung cancer cell line PC9 for half a year, and the creation of the EGFR-resistant cell line PC9 GR is used for analysis of DNA and RNA snares.そのResults, comparison of susceptible strains and resistant strains, においてDNA メチル化が高 し, The expression of mRNA is low and the expression is low, and the expression of mRNA is resistance to change.との关与が考えられる缝子を candidatesupplement伝子（s100p、klotho、c10orf116、RASSF1A、IGFBP3、）として同定した.さらにその candidate addendum 伝子の中から、IGFBP3、klotoho、s100pをcenterにanalyticを行った. Result: としてわずかではあるが, klotho やs100p がresistant に口与していることが考えられ, siRNA を用いたknock Downによって susceptible strains are resistant strains and resistant strains are resistant.ひとつひとつのメチル合うresistant へのeffect は小ないものの、多Several collections of cell lines have been developed to make them resistant and the possibilities have been tested. With the same result, future paper submissions will be decided. The person responsible for the funds will be responsible for the funds for studying abroad and the undergraduate research expenses, and the funds will be collected once the research is completed. Klotho's main resistance mechanism is reported in the same cell line, FGF2-FGFR1 activation is reported, and the correlation is determined.また、JiにanalyticをfinalえているHCC827 lung cancer cell lineでの同様なanalyticsと光らし合わせてよりuniversal の高い実験を行っていく下定としている.

项目成果

Aberrant DNA methylation and expression of mRNA in EGFR-mutant lung cancer cell line with long-term exposure to gefitinib

长期暴露于吉非替尼的 EGFR 突变肺癌细胞系中异常 DNA 甲基化和 mRNA 表达

• 发表时间: 2014
• 作者: A Hida;Y Ohsawa;S Kitamura;K Nakazaki;N Ayabe;Y Motomura;K Matsui;M Kobayashi;A Usui;Y Inoue;H Kusanagi;Y Kamei;K Mishima;梶原 千晶;Hideki Terai
• 通讯作者: Hideki Terai