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再生時特異的に機能する転写因子を起点とした両生類四肢再生過程を駆動する機構の解明

基于在再生过程中特异性发挥作用的转录因子，阐明驱动两栖动物肢体再生过程的机制

基本信息

批准号：
22KJ3137
负责人：
川住愛子
金额：
$ 2.33万
依托单位：
Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ツメガエルは高い再生能力をもっており、幼生期に四肢を切断しても完全に再生することができるが、変態後の幼若個体では再生能力が低下して主に１本の軟骨と表皮からなるパターンのない構造（スパイク）しか再生できない。本研究では、これまでに再生能力の高い幼生の四肢再生・発生過程における形態形成期についてトランスクリプトーム比較解析を行い、再生領域特異的に発現上昇する遺伝子10個を同定、そのうち最も再生特異性の高い2つの転写因子（X1, X2）のそれぞれについて、ネッタイツメガエルにおいてゲノム編集によりKO個体（機能欠損解析）を作製し、またアフリカツメガエルにおいて熱ショック応答により遺伝子発現を誘導できるTransgenic個体（機能獲得解析）を作製した。これらを解析した結果、KO個体(幼生)の四肢再生については、①自脚部の形態異常、②自脚部予定領域の低形成と細胞増殖の低下、③遠位/後方パターニング遺伝子の発現低下が確認され、またTg個体（変態後の幼若個体）の四肢再生ついては、④先端が２～３本に分岐した軟骨をもつ再生物の形成、⑤再生領域の遠位における一過的な膨大と細胞増殖の増加、⑥遠位/後方パターニング遺伝子の発現上昇が確認された。本年度は上記の結果のうちでX1のみでしか結果が得られていられない②, ③, ⑤, ⑥について、X2についても結果を得るために追加実験を行った。またその結果を含め、遺伝子X1とX2がツメガエル四肢再生に果たす役割について述べた論文を作成した。

The ability to regenerate is high, limbs are cut off during infancy, and the ability to regenerate is low after puberty. In this study, we compared and analyzed the morphological development period and the regrowth domain-specific occurrence increase of 10 genes in the regeneration ability of high middle and young limbs, and determined the highest regeneration specificity of high middle and young limbs. The gene expression of the gene is induced by the gene expression of the gene (function gain analysis). The results of this analysis include: (1) morphological abnormalities in the legs;(2) low formation and cell proliferation in the predetermined areas of the legs;(3) low development of distal/posterior legs; and (4) identification of Tg individuals.(4) The regeneration of limbs after transformation;(4) The differentiation of cartilage at the tip of 2~3 roots;(5) The expansion and cell proliferation at the distal position of the regeneration field;(6) The increase of the occurrence of cartilage at the distal/posterior position. This year, the results of the above records are recorded. The results are recorded in X1 and X2. The results are recorded in ②, ③, ③, ③ and X2. The results are recorded in X1 and X2. The results are recorded in X1 and X2. The results include: X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, X13, X14, X15, X16, X17, X18, X19, X10, X10, X11, X12, X19, X10, X11, X11, X12, X11, X11, X12, X12, X11, X12, X12, X1