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集団的リプログラミングとin-silico/ex-vivo統合環境によるバイオ人工肺の開発

通过集体重编程和体内/离体集成环境开发生物人工肺

基本信息

批准号：
22KK0132
负责人：
鈴木隆哉
金额：
$ 12.81万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-10-07 至 2027-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

人工的前駆細胞開発を行った。ヒト初代培養細胞を用い、いわゆる山中4因子を含む初期化リプログラミング因子をコードしたmRNAを細胞に導入した。17日かけて極めて増殖能力の高い細胞群が出現した。ほぼ同じプロトコールを用いて血管内皮細胞と気道上皮細胞の両方からコロニー形成能の高い前駆細胞様細胞が分離された。しかしこれらの細胞は遺伝子発現としてはNanogまで発現しており、かなりiPS細胞に近い状態であることが伺われた。問題点として細胞生存率の低下が挙げられる。これを克服するための薬剤やフィーダー細胞との共培養を行い、ある程度の成果を得ている。また分化度を確認するために（核内）タンパク質Nanog/Oct4の発現を確認するための免疫染色プロトコルを調整した。誘導プロトコルについてもｍRNAの作用時間をさらに下げて細胞増殖と分化度の維持が適切にコントロールできるか、検討している。また培地の調製も検討している。培地は予想よりも大きな影響を与えていることがわかり、いくつかの混合パターンを検討している。本研究のユニークな点は複数系統の細胞を出発材料として、統一的な方法により多様性をもった人工的前駆細胞集団を作り出し、それを臓器再生に用いることである。一つの多能性幹細胞からどれだけ多くの成熟細胞を作成するかというこれまでの視点から、成熟細胞の多様性を利用して増殖能と組織特異性を保った前駆細胞を利用する点で独自性がある。また安全性が高いmRNAを利用することにより、臨床展開がスムーズにできると考えた。

Artificial anterior stem cells are opened and closed.ヒト primary cultured cells were used, and いわゆるYamanaka 4 factors were introduced into the initialized リプログラミング factor をコードしたmRNA cells. On the 17th, a group of cells with extremely high proliferative capacity appeared. The same method is used to separate vascular endothelial cells and tract epithelial cells using high-precision vascular endothelial cells and duct epithelial cells. Nanogまで発appearsしており, かなりiPS cells にNearly い status であることがServing われた. The problem lies in the low cell survival rate. The result of overcoming the problem of co-cultivation of cells and the degree of success has been achieved.またdifferentiation degree をconfirmationするために（intranuclear）タンパク plasmid Nanog/Oct4の発appears をconfirmation するためのimmunostaining プロトコルをadjustment した. Induction of プロトコルについてもｍRNA action time をさらに下げて cells Propagation and maintenance of differentiation are appropriate and appropriate. The modulation of また平地のも検検している. The influence of えていることがわかり and いくつかの is mixed with the している. This research consists of a complex number system, a cell system, a material system, and a unified method.様性をもったArtificial anterior stem cell collection and り出し, それを蓓器 regeneration and use いることである.一つのpluripotent stem cellsからどれだけ多くのMature cellsを成するかというこれまでのViewpointから、成The diversity and utilization of mature cells means that they can proliferate and tissue-specifically, which is why the cells are unique in their use. The safety of the high-quality mRNA is high, and the clinical development of the mRNA is high.