葉緑体定位運動を指標にしたマイクロインジェクションによる光情報伝達系の解明

以叶绿体定位运动为指标的显微注射阐明光学信息转导系统

• 批准号: 08740631
• 负责人: 加川 貴俊
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08740631/
• 关键词: フィトクロム; シダ; 前葉体; 葉緑体光定位運動; マイクロインジェクション

既知の情報伝達物質をマイクロインジェクションにより注入し、葉緑体定位運動が誘導されるか否かを調べる。有力な候補となる物質が見つかった場合には、その物質に対応する細胞内在性の物質の動的変化を観察し、光受容部からの伝波が認められるか否かを調べる。これにより、光受容から反応までにいかなる化学物質が関与しているかを探索し明らかにすることを目標とした。本研究では、まず初めに、細胞に無毒と思われる、ルシファーイエロ-(LY)を注入した。前葉体細胞は一層の細胞層からで成り立っていたので観察しやすかったが、細胞表面に注入するのは大変困難であった。非常に低い頻度ではあったが、LYを注入した細胞を観察すると、正常に葉緑体光定位運動が観察された細胞があった。しかしながら、ほとんどの細胞は原形質分離を起こしてしまい、正常な反応を起こすことはなかった。また、正常に生き残った細胞を暗所で培養すると、原形質に注入したLYは液胞内に1ないしは2時間で取り込まれ、翌日には他の細胞に移動していた。これは、原形質連絡を通して、隣接する細胞に輸送されたと思われる。細胞にカルシュームイオンやEGTAを注入したが、強光により誘導される葉緑体運動は明確な差は認められなかった。今後の課題として、これまで以上にマイクロインジェクションの精度を上昇させる必要がある。また、原形質分離が生じてしまうことから、浸透圧の調節を考慮に入れながら、細胞にマイクロインジェクションする必要がある。

It is known that the information transmission substance is injected into the chloroplast, and the chloroplast localization movement is induced. When a substance is active, it can be detected and modulated by the change of the intrinsic property of the cell and the change of the movement of the substance. The relationship between chemical substances and light absorption is discussed. In this study, we found that there was no toxicity in the cells. It is difficult to observe the formation of cell layers in the somatic cells of the anterior leaf and inject them into the cell surface. Very low frequency of injection, normal chloroplast light localization, cell detection The cells were separated from each other and normal. The cells were cultured in the dark, and the protoplasm was injected into the cells for 1 to 2 days. The protoplast is connected to the adjacent cell and transported to the adjacent cell. The chloroplast movement induced by strong light was clearly identified by EGTA injection. In the future, it is necessary to improve the accuracy of the above problems. In addition, it is necessary to consider the regulation of protoplast separation and osmotic pressure.