抗セントロメア抗体陽性患者における70kD熱ショック蛋白に対する自己抗体の研究

抗着丝粒抗体阳性患者70kD热休克蛋白自身抗体的研究

• 批准号: 08877085
• 负责人: 坪井 紀興
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877085/
• 关键词: 熱ショック蛋白; 自己抗体; 抗セントロメア抗体

目的:70kD熱ショック蛋白(70kD heat shock protein:hsp70)に対する自己抗体の病的意義は不明である.最近私共は様々な基礎疾患をもつ抗セントロメア抗体陽性患者に血清中の抗hsp70抗体が高率に見出されることに気付いた.hsp70とセントロメアという一見無関係に思われる自己抗原に対する自己抗体が多くの患者に何故同時に出現しているかを知るため,その臨床的意義を明らかにし,さらに対応抗原の解析から自己免疫疾患の病因解明のための新たな研究手段が得る.方法:1)血清中抗セントロメア(CENP-A,CENP-B,CENP-C)抗体の同定.Discrete speckled型の抗核抗体を呈した患者血清について、同調培養した分裂期HEp-2細胞を用いてイムノグロブリンサブクラス別に間接蛍光抗体法上の抗セントロメア抗体を同定.さらに同調培養した分裂期HeLa細胞核を抗原としたイムノブロッティング法を行いイムノグロブリンサブクラス別にCENP-A、CENP-B、CENP-C各々に対する自己抗体を同定.3)患者B細胞よりのhsp70とセントロメアに対する特異的モノクローナル抗体の樹立.患者末梢血B細胞をEBウイルスによりトランスフォームした後ヒトーマウスハイブリドーマを作製しhsp70とセントロメアに対するヒトモノクローナル抗体を樹立,これらモノクローナル抗体を用いて対応抗原をを決定する.結果:抗hsp72抗体,抗hsp73抗体と抗CENP-A抗体,抗CENP-B抗体,抗CENP-C抗体の関連性は不明で,また真の対応抗原は同定されていないが抗セントロメア抗体陽性患者においてhsp70が自己抗原として何らかの病的役割を果たしている可能性が示唆された.

Objective:70kD heat shock protein: hsp70 is the most important protein in the development of anti-human antibodies. Recently, the incidence of anti-hsp70 antibody in serum of patients with anti-hsp70 antibody positive for underlying diseases has been high. The clinical significance of anti-hsp70 antibody in serum of patients with anti-hsp70 antibody positive for underlying diseases has been clarified. New research tools have been developed to elucidate the etiology of immune disorders. Methods:1) Identification of anti-nuclear antibodies (CENP-A,CENP-B,CENP-C) in serum. Discrete-speckled ANAs were detected in the serum of patients. The isochronous culture of HeLa cells in the mitotic phase was carried out by using the hsp70-hsp70 method. The hsp70-hsp70 antibody was identified by using the CENP-A, CENP-B and CENP-C antibody. B cells in the peripheral blood of the patient were used to establish antibodies to determine the antigen. Results: The relationship between anti-hsp72 antibody, anti-hsp73 antibody, anti-CENP-A antibody, anti-CENP-B antibody and anti-CENP-C antibody was unclear.