空胞性脊髄症の脊髄組織におけるHIV-DNA及びサイトカインmRNAの局在の検討-PCR/in situ hybridization法およびRT-PCR/in situ hybridization法を用いて-

空泡性脊髓病脊髓组织中 HIV-DNA 和细胞因子 mRNA 定位的检查 - 使用 PCR/原位杂交法和 RT-PCR/原位杂交法 -

• 批准号: 09877041
• 负责人: 高橋 清実
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877041/
• 关键词: AIDS; HIV; 空胞性脊髄症; PCR; in situ hybridization; RT-PCR; TNF-α; マクロファージ; ミクログリア; vacuolar myelopathy; VM

死後13時間以内に剖検されたAIDS患者の脊髄をホルマリン固定後パラフィン包埋し、5μmに切った切片を用いた。HE染色切片で空胞化の程度により、空胞性脊髄症(VM)をgrade I〜grade IIIに分け、各gradeから3例ずつ計9例と、コントロールとしてVMのないAIDS患者およびHIV抗体陰性者の脊髄切片を用いた。多核(巨)細胞の見られる、いわゆる“HIV myelitis"を伴う症例では、一部の多核細胞の核およびミクログリア小結節内のマクロファージ/ミクログリア(Mφ/MG)の核にHIV-1 proviralDNA(gag領域)が、PCR/in situ hybridization(PCR/ISH)法により検出された。そのミクログリア小結節近傍の空胞性変性部位におけるMφ/MGにおいても、少数ではあるが同じくHIV-1proviral DNA陽性の細胞がみられた。しかしoligodendrogliaにおける陽性細胞は明らかではなかった。また“HIV myelitis"のないVMでは、空胞性病巣部におけるHIV感染細胞は明らかではなかった。(未発表)HIV感染者における中枢神経障害の間接的な病因の一つとして、サイトカインーー特にTNF-αの関与が考えられている。RT-PCR/ISHにより、TNF-αのmRNAの発現および局在について検討した。TNF-α mRNAはおもにMφ/MGに検出された。VMのあるAIDS症例では、VMのないものより多くのMφ/MGに発現していた。さらに症例を増やし、空胞性変性との関連および他のサイトカインmRNAの発現について検討しなければならない。

Within 13 hours after death, the spinal cord of AIDS patients was dissected and fixed, and then embedded and cut into 5μm sections. HE stained sections were used in 9 cases of vacuolation, 3 cases of vacuolar myelopathy (VM) from grade I to grade III, and 3 cases of VM from grade I to grade III. HIV-1 DNA (gag domain) and PCR/in situ hybridization(PCR/ISH) methods were used to detect HIV-1 DNA in multinucleated cells. A small number of HIV-1 primal DNA positive cells were found near the cellular sex sites. The positive cells are bright and bright. "HIV myelitis" is a virus infection caused by HIV infection. (Unreported) Indirect etiology of central nervous dysfunction in HIV infected individuals: a review of TNF-α and its relationship with HIV infection. RT-PCR/ISH detection, TNF-α mRNA expression and detection TNF-α mRNA is expressed in Mφ/MG. VM and AIDS cases, VM and Mφ/MG appear in many cases In addition, the number of cases increased, the relationship between cellular variability and the expression of mRNA in other cells increased, and the number of cases increased.