アンチセンスDNA法による誘導型NO産生の特異的抑制の試み

尝试使用反义DNA方法特异性抑制诱导的NO产生

• 批准号: 09877233
• 负责人: 丹正 勝久
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877233/
• 关键词: アンチセンスDNA法; 敗血症; nitric oxide; antisense oligodeoxynucleotide; Nitric oxide; Antisense DNA; inducible nitric oxide synthase

ヒトinducible nitric oxide synthase(iNOS) mRNAに対するantisense oligonucleotide(AON)を作製し、ヒト血管内皮細胞および単球iNOS誘導に基づくNO生成の特異的抑制を試みた。対照としてsense oligonucleotide(SON)を作製し用いた。健常成人5例より得た培養単球を2群に分け、一方にAON(A群)、他方にSON(C群)を添加し、IFNγ+LPSによるNO産生刺激下に24時間培養した。AON,SONの添加量は段階的に200,400,800μ mol/Lの3系を設定した。次いで、単球iNOS mRNA発現の有無、培養上清NO2値の検索を行い両群間で比較した。結果は、両群3系ともiNOS mRNAの発現を認めたが、培養上清NO2値はA群が400μmol/L以上の投与系で、C群に比し有意の低値を示した。以上より、AONは血管内皮細胞および単球のNO生成をiNOS mRNAからNOに至るtranslationの段階で濃度依存性に、特異的に抑制したものと考えられる。

To investigate the specific inhibition of inducible nitric oxide synthase(iNOS) mRNA against antisense oligonucleotide(AON) production in vascular endothelial cells and cells. For example, sense oligonucleotide(SON) is used in the control system. 5 healthy adults were cultured in 2 groups, one group in AON(group A), the other group in SON(group C), IFNγ+LPS and NO production for 24 hours. The addition amount of AON and SON is set to be 200, 400, and 800 μ mol/L in 3 series. The expression of iNOS mRNA in culture supernatant and NO2 value in culture supernatant were compared among groups. The results showed that the expression of iNOS mRNA in group 3 and group C was significantly lower than that in group A and group C, respectively. AON inhibits NO production in vascular endothelial cells in a concentration-dependent and specific manner.

项目成果

丹正勝久: "Antisense oligonucleotideによるヒト単球誘導型nitric oxide産生の特異的抑制" 日本外傷学会雑誌. 13(1). 6-12 (1999)

Katsuhisa Tansho：“反义寡核苷酸对人类单核细胞诱导的一氧化氮产生的特异性抑制”，日本创伤学会杂志 13(1) (1999)。

KATSUHISA TANJOH: "The effect of antisense oligodeoxynucleotides on the nitric oxide production of human vascaiar endothelial ceils" International Journal of Surgical Sciences. Vol.5・NO3. 85-88 (1998)

KATSUHISA TANJOH：“反义寡脱氧核苷酸对人血管内皮细胞一氧化氮产生的影响”国际外科科学杂志第 5 卷·NO3（1998 年）。