脱細胞化技術を用いた新規小口径グラフトの開発と大動物CABGへの適応

利用脱细胞技术开发新型小直径移植物及其在大型动物CABG中的应用

• 批准号: 22K12826
• 负责人: 金山 拓亮
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12826/
• 关键词: 脱細胞; 小口径グラフト; 冠動脈バイパス術; 再細胞化

冠動脈バイパス術(CABG)は優れた成績が報告されているが、異所性自家グラフトは採取する際の侵襲が大きく、グラフトの状態によっては使用困難な場合もある。また完全内視鏡下CABGでも優れた成績が散見され、我々の教室でも小切開下CABGを開始しており、今後低侵襲手術がCABG手術の主流となることに疑いの余地はない。CABG手術をより多く低侵襲で提供するために他家小口径ロンググラフト技術の開発が急務である。他家小口径ロンググラフトでは、「①免疫反応」、「②開存性の低さ」の課題があり、未だ確立した技術はなく、さらに他家小口径ロンググラフトのCABG手術下での使用と検討が行われている論文は極めて少ない。そこで本研究では、これらの課題を克服可能とするために、他家由来の生体脱細胞化血管グラフト作製のプロトコール確立と、臨床応用を想定した大動物(ブタ)CABG手術での開存性を明らかにする。他家グラフトで課題となる「免疫反応」について摘出した臓器から細胞だけを除去し残された線維性タンパク質や成長因子から成る細胞外マトリックス骨格を生成する脱細胞化に着目し免疫原性の低下を図る。「開存性の低さ」については脱細胞化グラフトのコラーゲンの露出による易血栓作用が既に知られているため、抗血栓性コーティングに、我々が注目しているヘパリンーゼラチングラフトコーティング下でのブタ血管内皮細胞の再細胞化を行い開存性の向上を目指す。また生体マテリアルについては、汎用性の高いブタ頸動脈を選択した。作成したグラフトを病理組織検査・力学的検査にて検証する。ヒトと生体構造が近いブタを使用し、off-pump CABG手術下で開存性を検討する。左前下行枝に末梢吻合を行い、中枢側を結紮することにより心筋梗塞モデルを作成し、3日後、7日後、14日後に冠動脈造影で血流を評価し、摘出したグラフトの病理学的評価を詳細に行う。

尽管据报道冠状动脉搭桥率（CABG）的效果很好，但在收获时异位自身抗体具有很高的侵入性，并且取决于接枝条件，但可能很难使用。此外，在完全内窥镜的CABG中已经观察到了出色的结果，我们的教室也在小切口下开始了CABG，因此毫无疑问，最小的侵入性手术将来将成为CABG手术的主流。迫切需要多口径长移植技术的开发，以提供最小的侵入性提供更多的CABG手术。在透明小口径的长移植物的情况下，存在诸如“ 1）免疫反应”和“ 2）低通态的问题，并且尚无既定技术，而且在CABG手术下使用并检查了很少的论文。为了克服这些挑战，这项研究将建立一种从其他家庭生产生物脱细胞血管移植物的方案，并阐明大型动物（PIG）的CABG手术通畅，并考虑到临床应用。经晶格挑战的“免疫反应”集中在脱细胞上，该脱细胞仅清除提取器官中的细胞，并产生由剩余的纤维化蛋白和生长因子组成的细胞外基质骨架，旨在降低免疫原性。关于“低通畅性”，已经知道，从脱细胞移植物中暴露胶原蛋白的血栓形成效应易于血栓形成，因此我们旨在通过在肝素 - 明优质移植物涂层下延迟猪血管内皮细胞来提高通畅性，我们将重点放在抗死型涂料上。此外，对于生物材料，选择了高度用途的猪颈动脉。使用组织病理学和机械测试对移植物进行了验证。使用类似于人类的解剖结构的猪在非泵的CABG手术下检查患者。通过向左前降降细胞进行外围吻合并与中心牵引，从而创建了心肌梗死模型。血流通过3、7和14天后的冠状动脉血管造影评估，并详细进行去除的移植物的病理评估。