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Development of A Novel Disease Model for Hypertensive Disorders of Pregnancy Using Menstrual-Blood-Derived Cells from Patients

利用患者经血来源的细胞开发妊娠期高血压疾病的新疾病模型

基本信息

批准号：
22KJ2784
负责人：
細谷聡史
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

初年度に我々は患者由来のMenSCsの初代培養系の確立とその細胞特性解析を行った。主に不妊外来に通院中である不妊症患者から外来での内診時に月経血を採取し初代培養を行った。対象となった16症例のうち10例で紡錘形の間葉系細胞の初代培養に成功した。採取された細胞において間葉系幹細胞の特徴であるプラスチック培養皿への生着性・増殖性を有すること、脂肪・骨・軟骨への分化能を有すること、またFlow cytometryにより間葉系幹細胞に特徴的である表面マーカーのCD73, CD90, CD105が陽性であることを確認した。以上より我々は月経血間葉系幹細胞の初代培養系を確立することができた。次に我々はコラーゲン基質を用いた子宮内膜の3次元培養法の検証を行った。具体的には1×10^6個の子宮内膜間質細胞をコラーゲンゲルとともに1週間培養し子宮内膜間質シートを作成したのち、1×10^6個の子宮内膜上皮細胞をシート上に播種しさらに1週間培養した。本手法で作成したシートは組織学的に子宮内膜様構造を有し、またエストロゲン、プロゲステロン、cAMPの添加により脱落膜化(ホルモン反応性)に関わる因子(PRL、IGFBP-1)のmRNA発現の上昇をqRT-PCRで確認した。以上より我々は子宮内膜の3次元培養法の基盤技術を確立することができた。以上の通りこれまでの研究の進捗状況は順調である。今年度は患者由来月経血間葉系幹細胞のパラクリン能を評価するとともに、3次元子宮内膜シートと絨毛細胞との共培養系の確立を検証する予定である。

Establishment and characterization of primary culture lines of MenSCs derived from patients in the early years The primary culture was performed in patients with non-pregnancy and in patients with non-pregnancy. The primary culture of spindle mesenchymal cells was successful in 10 cases of 16 cases. The characteristics of mesenchymal stem cells in culture were analyzed and the differentiation ability of adipose tissue, bone tissue and cartilage tissue was confirmed by flow cytometry. The establishment of primary culture lines of mesenchymal stem cells The third dimension culture method of endometrium was used to examine the endometrial tissue. Specifically, 1 × 10^6 endometrial stromal cells were cultured for 1 week. 1 × 10^6 endometrial epithelial cells were cultured for 1 week. This method was used to establish the presence of histomorphological factors in endometrial structure, including cAMP, cAMP, sloughing, and mRNA expression of factors (PRL, IGFBP-1). The above-mentioned three-dimensional culture method of endometrium and the establishment of the base plate technology The progress of the above research is in order. This year, the patient derived mesenchymal stem cells can be evaluated, and the establishment of co-culture lines of three-dimensional endometrial cells and villi cells can be determined.