Ethyline signaling pathway: interaction of the ETRI receptor with the CTRI kinase

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In Arabidopsis sind mittlerweile fünf Ethylenrezeptoren bekannt. Sie alle vermitteln die Ethylenantwort über CTR1, einem Protein mit Homologie zu mitogenaktivierten Proteinkinasekinasekinasen (MAPKKK's). Über das Two Hybrid System konnte gezeigt werden, daß der Rezeptor ETR1 mit CTR1 direkt interagiert. In Hefen, die über ähnlich aufgebaute Kaskaden Signale weiterleiten, sind an dieser Stelle stets andere Komponenten für die Vermittlung zwischen Rezeptor und Kinase zuständig. Im Rahmen dieses Forschungsvorhabens soll diese Interaktion näher untersucht werden. Es existiert eine mutierte Kinase ctr1-8, die aufgrund eines Aminosäureaustausches nicht mehr mit dem Rezeptor interagiert. Sie soll eingesetzt werden, um nach Rezeptormutanten zu suchen, die diese Mutation der Kinase unterdrücken können. Dazu wird über fehlerhafte PCR eine Bank veränderter ETR1 Rezeptorproteine hergestellt und im Two Hybrid System nach solchen gesucht, die wieder eine Interaktion zeigen. Anschließend soll die Bindung dieser Mutatnten in vitro charakterisiert werden. Durch Tranformation in transgene ctr1-8 Pflanzen und in WT Arabidopsis wird dann die Relevanz dieser Interaktion in vivo untersucht werden.