蛋白質分子集合体構造の形成と機能

蛋白质分子组装结构的形成与功能

• 批准号: 61130002
• 负责人: 朝倉 昌
• 金额: $ 8.83万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61130002/
• 关键词: ATP合成酵素; 微小管の動的不安定性; アクチン-ミオシン間の滑り運動機構; 膜を裏打ちする動的骨格構造; 細胞接着蛋白質カドヘリン

1.好熱菌ATP合成酵素を人工平面膜にうめこみ、【H^+】電流の直接測定に成功した。これにより180mVの印加電圧でATP依存性電流が止ること、及び【H^+】/ATP比が3であることを示した。2.蛍光標識したFアクチンを用いることにより、ATP存在下でミオシンと相互作用する単一アクチン繊維の動きを顕微鏡で直接観察することができる。この方法により、トロポミオシン・トロポニンを結合したアクチン繊維の滑り運動が【Ca^(2+)】イオン及び温度によって転移的に調節されることを示した。3,同じ方法よって、パパインで調製した単頭ミオシンが未処理の双頭ミオシンと同じ程度の滑り方発生能を持つことを見出し、力発生機構に双頭間の協力が必要であることを示唆した。さらに、ミオシン繊維上の頭部の数を5個まで減らしても毎移約5μmの滑り速度を生むことから、IATPサイクル当りの滑り距離が約80nmにも及ぶことを示した。この距離を理解するために、新しい分子機構の建設が待たれる。4.微小管はチューブリンの重合体であるが、その1本1本の挙動を暗視野顕微鏡で映像化した。精製チューブリン系では重合定常状態においても、各微小管は常に伸長(重合)と急速な短縮(脱重合)をくりかえしている。つまり各微小管は互に独立に重合相と脱重合相の間を可逆的に転移している(動的不安定性)。チューブリン重合にはGTP分解が共役しているが、これが二相性を生んでいる可能性があり、研究の進展が待たれる。5.ヤリイカ光受容細胞の微絨毛はアクチン繊維により裏打ちされているが、光刺激によりこの繊維が切断されることを急速冷結電顕法によって発見した。6.細胞接着蛋白質カドヘリンには特異性の異なるE,N,P型等が存在するが、それぞれのcDNAのシークエンスから、これらの間に共通した配列部分のあることを発見した。

1. The ATP synthesis enzyme of Bacillus thuringiensis was tested successfully by artificial plane membrane and [H ^ +] current directly. Please check the 180mV

项目成果

H.Honda;H.Nagashima;S.Asakura: Journal of Molecular Biology. 191. 131-133 (1986)

H.本田；H.长岛；S.朝仓：分子生物学杂志。

S.Tsukita:S.Tsukita;G.Matsumoto: Nature. (1987)

S.Tsukita：S.Tsukita；G.Matsumoto：自然。

H.Hirata;K.Ohono;N.Sone;Y.Kagawa;T.Hamamoto: Journal of Biological Chemistry. 261. 9839-9843 (1986)

H.Hirata；K.Ohono；N.Sone；Y.Kakawa；T.Hamamoto：生物化学杂志。

Y.Harada;A.Noguchi;A.Kishino;T.Yanagida: Nature. (1987)

Y.Harada；A.Noguchi；A.Kishino；T.Yanagida：自然。

T.Yanagida;F.Oosawa;M.Nakao et al.ed.: "Energy Transduction in ATPase."Range of Movement over Which Myosin Cross-bridges can Attach to Actin Filament during One ATP Cycle"" Academic Press,Inc. New York,U.S.A., (1987)

T.Yanagida;F.Oosawa;M.Nakao 等人：“ATP 酶中的能量转导。“在一个 ATP 周期内肌球蛋白跨桥可以附着到肌动蛋白丝上的运动范围””学术出版社，Inc.