培養巨核球の成熟調節機構の解析

培养巨核细胞成熟调控机制分析

• 批准号: 61570571
• 负责人: 長沢 俊郎
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570571/
• 关键词: 培養巨核球; ATP量; セロトニン量; DNA量; エリスロポエチン; 血小板減少血清

マウス巨核球系前駆細胞(CFU-M)をpokeweed mitogen刺激脾細胞培養上清(PWM-SCM)の存在下で液体培養し、誘導される巨核球のDNA量,ATP量,セロトニン量,電顕による成熟度を経時的に観察し、遺伝子操作によるエリスロポエチン(r-Ep)と血小板減少血清(TS)の単独あるいは同時添加による各パラメターの変化を測定し、r-EpとTSの作用点を検討した。PWM-SCMのみで誘導される巨核球の培養7日目のDNA量(6.13±1.29N),ATP量(8.50±1.64mH/【10^6】mega),セロトニン量(19.7±2.4mg/【10^5】mega)と低値であり、電顕による成熟度の観察でも未熟型が大部分であった。r-Epを添加した場合、DNA量(13.05±4.12N),セロトニン量(70.3±11.4mg/【10^5】mega)と増加をみるのに対して、ATP(14.31±2.23mΜ/【10^6】mega)量は増加せず、電顕による解析でも未熟型が多くみられた。一方、TSを添加した場合、DNA量(8.38±1.61N),セロトニン量(28.3±5.9mg/【10^5】mega)の軽度の増加がみられたのに対して、ATP量(21.61±2.17mΜ/【10^6】mega)は著増がみられた。r-EpとT.Sを同時に添加した場合のDNA量(12.36±3.35N),セロトニン量(67.3±10.6mg/【10^7】mega),ATP量(29.31±3.01mΜ/【10^6】mega)はPWM-SCM単独の場合よりも著明な増加をみたものの、正常骨髄より分離した巨核球のDNA量(14.42±3.45N),セロトニン量(85.3±13.7mg/【10^5】mega),ATP量(33.61±3.15mΜ/【10^6】mega)に比し低値であった。r-EpとT.Sを同時添加により誘導された巨核球の電顕像では血小板分離膜,血小板densegranulaの発育の良好なものが多くみとめられた。以上の結果より、r-EpはDNA量,セロトニン量に作用し、T.SはATP量の調節に関与することが判明した。すなわち、r-Epは巨核球の成熟段階の早期に作用し、T.Sは成熟段階の後期に作用することが推察された。CFU-Mの分化,成熟にはMeg-CSFとM-potentiatorの二種の因子が必要と考えられているか、M-potentiatorもheterogeneousである可能性が示唆された。

Megakaryocytic progenitor cells (CFU-M) and pokeweed mitogen-stimulated spleen cell culture supernatant (PWM-SCM) were cultured in liquid medium and induced to produce DNA, ATP,ATP, E, E, T, T, r-EP and TS are discussed. DNA content (6.13±1.29N),ATP content (8.50±1.64mH/[10^6] mega), and ATP content (19.7±2.4mg/[10^5] mega) of megakaryocytes induced by PWM-SCM were measured at 7 days of culture. When r-Ep was added, the amount of DNA (13.05±4.12N), ATP (70.3±11.4mg/[10^5] mega) and ATP(14.31± 2.23mg/[10^6] mega) increased, respectively. When TS was added, the amount of DNA (8.38±1.61N), ATP (28.3±5.9mg/[10^5] mega) and ATP (21.61± 2.17mg/[10^6] mega) increased. r-Ep and T.S are added at the same time.(12.36±3.35N),(67.3±10.6mg/[10^7] mega),ATP content (29.31±3.01m M/[10^6] mega) Compared with PWM-SCM alone, the DNA content of megakaryocytes (14.42±3.45N), the ATP content (85.3±13.7mg/[10^5] mega) and ATP content (33.61±3.15m/[10^6] mega) were lower than those of normal bone marrow. r-Ep and T.S are added simultaneously to induce the formation of megakaryocytes and platelets. The above results demonstrate that r-Ep plays a role in DNA amount and ATP amount, and T.S is related to the regulation of ATP amount. The early effects of T.S. on the mature stage of megakaryocytes were investigated. CFU-M differentiation, maturation, Meg-CSF and M-potentiator two factors are necessary to investigate, M-potentiator heterogenous, the possibility of the two factors is discussed.

项目成果

長澤俊郎: 日本血液学会雑誌. 49(2). 65 (1986)

长泽敏郎：日本血液学会杂志 49(2) 65 (1986)。

T.Nagasawa;T.Neichi;K.Satoh;M.Nakazawa;T.Abe: Experimental Hematology.

T.Nagasawa；T.Neichi；K.Satoh；M.Nakazawa；T.Abe：实验血液学。